Анализ оптокинетического ответа: метод измерения остроты зрения у рыбок данио

0 просмотров4:02 мин • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- Закрепите рыбу под наркозом на платформе так, чтобы ее глаза и жабры выходили за край платформы. Поместите рыбу вертикально в наполненный водой цилиндр внутри хорошо освещенного барабана, который может свободно вращаться. Как только рыба оживет, о чем свидетельствуют жабры и движения глаз, поместите в барабан решетку или узор из чередующихся белых и черных вертикальных полос. Теперь поместите сплошной черный окклюдер поверх полос в поле зрения левого глаза.

Начните вращение и запишите оптокинетическую реакцию, OKR, для правого глаза. OKR состоит из рефлекторных движений глаз в ответ на визуальный стимул. Заменяйте узор все более и более мелкими черными и белыми полосами, пока движение глаз не перестанет наблюдаться. Проделайте ту же процедуру для левого глаза.

Для вычисления монокулярной остроты зрения, умения различать мелкие детали, измеряют расстояние от центра хрусталика глаза до рисунка и длину мельчайшего рисунка пары белых и черных полос, при котором наблюдалось движение глаза. В примере протокола мы будем использовать оптокинетический ответ для измерения монокулярной и бинокулярной остроты зрения у взрослых рыбок данио

.

- Оптокинетические исследования проводятся с помощью специально сконструированного записывающего устройства с использованием вращающегося барабана диаметром 14,5 сантиметров, стереомикроскопа с регулируемыми настройками интенсивности света, компьютера и камеры для захвата изображений и записи. Микроконтроллер с компьютерным управлением используется для регулировки скорости вращения барабана и направления вращения. Используя рыб, которые содержатся в стандартных условиях, начните анализ с обезболивания рыбы 0,016% трикаином в течение двух-трех минут, а затем поместите ее на небольшую платформу с подвешенными через край глазами и жабрами.

Чтобы обездвижить рыбу и избежать травм, положите тонкую губку или полотенце на тело рыбы и приколите два-три кусочка пены над рыбой, ограничивая движение хвоста. Поместите рыбу в цилиндрический резервуар, наполненный водой, который помещается внутри вращающегося барабана записывающего устройства OKR. С помощью магнитов на платформе расположите рыбу вертикально с глазами примерно в 7,3 сантиметрах от края барабана.

Как только рыба оправится от анестезии и будет наблюдаться нормальное дыхание и случайные движения глаз, поместите базовую решетку со скоростью 0,07 циклов на градус или CPD во вращающийся барабан и включите компьютерные элементы управления, чтобы начать вращение и захват видео. После того как базовая решетка инициирует первоначальный OKR, кратковременно приостановите вращение и замените решетку на решетку меньшего размера с более высокой пространственной частотой. Повторяйте этот процесс с последовательно меньшими решетками до тех пор, пока OKR больше не будет выявляться. Чтобы проверить потерю OKR, после модифицированного подхода к лестнице повторите испытание с наименьшей решеткой, вызвавшей OKR, а затем с решеткой, которая не вызвала реакцию, чтобы проверить потерю OKR.

Чтобы получить монокулярные измерения остроты зрения, поместите черный пластиковый окклюдер на полосы, прилегающие к противоположному глазу, и повторите процесс сбора данных. Затем переключитесь на другой глаз, изменив положение окклюдера и проведя измерения. Используйте эталонную измерительную полоску под аквариумом, чтобы записать расстояние каждого глаза от полоски для точного измерения остроты зрения.

Чтобы определить остроту зрения, рассчитайте CPD по следующей формуле, где a — расстояние от центра линзы до решетки, а h — длина одного цикла наименьшей решетки, на которой наблюдался OKR. Для комбинированных измерений остроты зрения используйте среднее значение, рассчитанное как для левого, так и для правого глаза.

13:01

Использование Light Sheet флуоресцентной микроскопии для изображения развития данио глаз

Похожие видео

0 Просмотры

10:07

Изучая диабет глазами рыбы: Microdissection, визуализации и анализа взрослых tg(fli:EGFP) сетчатки сосудистую данио рерио

Похожие видео

0 Просмотры

11:01

Подготовка Ломтики свежих сетчатки от взрослых рыбок данио для Ex Vivo изображений эксперименты

Похожие видео

0 Просмотры

09:39

Поведенческие Пробирной для измерения Отзывчивость данио рерио на изменения в интенсивности света

Похожие видео

0 Просмотры

08:59

Использование optokinetic ответ на исследование зрительной функции данио

Похожие видео

0 Просмотры

05:51

VisioTracker, инновационный автоматизированный подход к анализу Глазодвигательный

Похожие видео

0 Просмотры

02:20

Анализ фотомоторной реакции: метод измерения поведенческой реакции личинок данио-рерио на внезапное изменение условий освещения

Похожие видео

0 Просмотры

03:04

Избегание рыбок данио и анализ тигмотаксиса: высокопроизводительный метод изучения поведения личинок в ответ на аверсивный визуальный стимул

Похожие видео

0 Просмотры

04:56

Оптокинетических отклика в качестве количественной меры остроты зрения у рыбок данио

Похожие видео

0 Просмотры

08:34

Простой Поведенческая Анализ для тестирования зрительной функции в Xenopus Laevis

Похожие видео

0 Просмотры

Последнее обновление: 1 августа 2026