Энциклопедия экспериментов JoVE
Биология
0 просмотров • 3:02 мин. • April 30th, 2023
- Один из подходов к определению функции гена заключается в том, чтобы подавить его экспрессию и наблюдать за эффектом. Морфолигомеры часто используются в исследованиях нокдауна на рыбках данио. Морфолино представляет собой синтетическую ДНК-подобную молекулу длиной около 25 оснований, которая подавляет экспрессию целевых генов.
Для лечения морфолино поместите обезболенную рыбу с частично ампутированным хвостовым плавником на инъекционную пластину и поместите пластину под стереомикроскоп. Вводите только дорсальную сторону, в то время как неинъецированная вентральная сторона действует как контроль. Morpholinos могут функционировать двумя способами в зависимости от последовательности, на которую они нацелены. Во-первых, они соединяются с сайтом начала трансляции на мРНК и предотвращают синтез белка, блокируя трансляцию.
Во-вторых, он может связываться с интрон-экзонным соединением на пре-мРНК и предотвращать надлежащий сплайсинг, что приводит к дефектному транскрипту, который будет разрушаться клеткой. Позже осмотрите хвостовые плавники на предмет выроста. Различия между возобновлением роста обработанных и необработанных областей указывают на то, что целевой белок играет роль в реген
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео