Энциклопедия экспериментов JoVE
Биология
0 просмотров • 4:28 мин. • April 30th, 2023
- Сначала приготовьте агарозу, добавив среду Е3, которая поставляет кальций к дехорионированным эмбрионам в расплавленную агарозу. Далее добавьте MS222 для обезболивания эмбрионов. Охладите агарозную смесь до 38 градусов Цельсия, близко к застыванию. Выберите несколько дехорионированных эмбрионов, экспрессирующих флуоресцентные белки, и перенесите их в агарозную смесь.
Далее полностью вставьте поршень в стеклянный капилляр и вытяните один зародыш, следя за тем, чтобы он вошел головой вперед. Как только агароза застынет, используйте ленту, чтобы удерживать капилляр в вертикальном положении в стакане, содержащем среду E3. Открытое дно капилляра способствует газообмену для образца эмбриона.
Поместите капилляр в держатель образца светового флуоресцентного микроскопа. Лазер образует тонкий световой слой, позволяющий объекту обнаружения, расположенному перпендикулярно образцу, получить изображение поперечного сечения. В примере протокола мы установим эмбрионы рыбок данио-рерио для визуализации развивающегося глаза.
Начните с подготовки агарозы. Растопите подготовленный 1 миллилитр аликвоты 1% низкой температуры плавления агарозы в среде Е3 при температуре 70 градусов Цельсия. Примерно че
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео