Энциклопедия экспериментов JoVE
Биология
0 просмотров • 2:47 мин. • April 30th, 2023
- Переложите рыбу под наркозом трикаина на влажную губку спинной стороной вверх. Поместите губку, несущую рыбу, под микроскоп. Расположите иглу для микроинъекций под углом 45 градусов от оси тела рядом с тыльной мышцей.
Затем найдите место перед спинным плавником, которое не покрыто чешуей, куда вы можете ввести иглу без приложения больших усилий. Затем аккуратно введите иглу и медленно введите в мышцу интересующее соединение вместе с маркером, таким как феноловый красный.
Если интересующее соединение содержит генетический материал, электропорируйте клетки, поместив электроды по обе стороны от места инъекции и подав ток. Ток делает мышечные клетки проницаемыми и способными эффективно поглощать генетический материал. После процедуры сразу же пересадите рыбок в восстановительный резервуар. В следующем протоколе мы проведем внутримышечную инъекцию взрослой рыбке данио, чтобы доставить ДНК-вакцину против микобактериоза.
Чтобы удержать рыбу в фиксированном положении во время инъекции, используйте в качестве набивки кусок губки с углублением, вырезанным посередине. Тщательно замочите губку в воде системы и установите ее в чашку Петри. С помощью пластиковой ложки переложите рыбку данио-ре
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео