Энциклопедия экспериментов JoVE
Биология
0 просмотров • 3:58 мин. • April 30th, 2023
- Поместите двух самок и двух самцов рыб в разделенный аквариум для разведения за одну ночь до инъекции. На следующее утро снимите разделитель и дайте рыбам размножаться, пока вы не увидите икру на дне аквариума. Соберите яйца и промойте их средой Е3, содержащей метиленовый синий, фунгицид. Понаблюдайте за яйцами под микроскопом и удалите неоплодотворенные. Неоплодотворенные яйца имеют прозрачную желточную оболочку, в то время как оплодотворенные яйца имеют темно-желтковую оболочку.
Храните 10 эмбрионов в отдельной чашке Петри в качестве неинъекционного контроля. С помощью пипетки для переноса выровняйте эмбрионы в желобке микроинъекционной пластины при комнатной температуре и поместите ее под микроскоп. Осторожно введите иглу для микроинъекций через хорион в желток и медленно введите интересующее вас соединение, содержащее такой маркер, как феноловый красный. Цитоплазматический поток позволяет соединению диффундировать в эмбриональные клетки.
После инъекции выращивают эмбрионы в среде Е3 с метиленовым синим при температуре 28 градусов Цельсия. Продолжайте следить за здоровьем эмбрионов. Удаляйте все мертвые или аномально развивающиеся эмбрионы и ежедневно меняйте среду. В следующе
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео