Совместное культивирование клеток РМЖ: культивирование клеток рака молочной железы с костными фрагментами для изучения пролиферации раковых клеток

Начните с помещения кусочка костного воска в две пластины для клеточных культур, помеченные как тестовые и контрольные. Пипеткой нанесите необходимое количество биолюминесценции, экспрессирующей клетки рака молочной железы, в центр каждой пластины и инкубируйте пластины в течение определенного времени, чтобы способствовать прикреплению клеток. Поместите небольшой костный эксплант на костный воск в тестовой пластине и закрепите его, прижав к нему.

Медленно влейте среду для клеточных культур с фетальной бычьей сывороткой, добавкой для роста, на каждую сторону пластины, чтобы погрузить эксплант и инкубировать при температуре 37 градусов Цельсия в течение определенного времени. Костная ткань в тестовой пластине высвобождает растворимые факторы, такие как цитокины и киназа SRC, которые привлекают клетки рака молочной железы, что приводит к их миграции. Добавьте подложку к каждой пластине и поместите пластины в камеру биолюминесцентной визуализации.

Раковая клетка, экспрессирующая биолюминесцентный белок, окисляет субстрат и излучает свет. Количественная оценка пролиферации путем измерения общего количества фотонов, излучаемых каждой клеткой с помощью программного обеспечения. Раковые кл