zPDX-анализ инвазивности: исследование инвазивного поведения метастатических раковых клеток в ксенотрансплантатах эмбрионов данио-рерио

Ксенотрансплантаты эмбрионов рыбок данио полезны для изучения инвазии раковых клеток. Подготовка моделей ксенотрансплантатов путем введения флуоресцентно меченых метастатических раковых клеток и нераковых клеток в перивителлиновое пространство двух трансгенных эмбрионов. Перивителлиновое пространство — это пространство между перидермой эмбриона и желточным мешком. Дайте эмбрионам расти в течение нужного срока.

В течение этого периода метастатические раковые клетки агрессивно делятся в месте инъекции, в то время как нераковые клетки остаются стабильными. После инкубации с помощью пастеровской пипетки перенесите эмбрионы в стеклянную донную суспензионную чашку. Удалите лишнюю воду из яиц и расположите эмбрионы в нужном положении для визуализации. Держите крышку на чашке и поместите чашку под микроскоп с ярким полем.

Получение изображений и анализ инвазивного поведения обоих типов клеток. Метастатические раковые клетки имеют тенденцию проникать в кровеносные сосуды от места инъекции. Они движутся по кругу кровообращения, а затем внедряются в окружающие ткани для размножения. Напротив, нераковые клетки остаются в месте инъекции. В примере протокола мы будем вводить клетки рака молочной железы в перивителлиновое пространство и проток Кювье в моделях ксенотрансплантатов данио-рерио для изучения метастазирования.

Чтобы визуализировать метастазирование, с помощью пастеровской пипетки перенесите введенный эмбрион данио-рерио в чашку из полистирола со стеклянным дном и удалите лишнюю воду из яиц. Визуализируйте все тело эмбриона с помощью конфокального микроскопа, установленного на низкое увеличение, чтобы получить общую картину диссеминации опухолевых клеток.

Используйте лазер с яркостью 488 нанометров для визуализации сосудистой сети эмбриона рыбки данио-рерио и лазер с яркостью 543 нанометра для визуализации имплантированных опухолевых клеток, помеченных красным флуоресцентным маркером. Затем отсканируйте эмбрион в восемь-десять этапов, чтобы получить высококачественное изображение.

• Zebrafish Embryo Xenografts - A research tool used to study cancer cell invasion.
• Perivitelline Space - A niche between the zebrafish embryo periderm and the yolk sac.
• Metastatic Cancer Cells - Malignant cells that can spread aggressively and invade lots areas .
• Non-cancerous Cells - Stable cells that do not invade or proliferate like cancer cells.
• Invasiveness - The capacity of cancer cells to infiltrate healthy tissues.

• Define the concept of Zebrafish Embryo Xenografts - These are used for studying cancer invasion (e.g., invasiveness).
• Outline the Perivitelline Space - It serves as the injection site for xenografts (e.g., perivitelline space zebrafish).
• Describe Metastatic Cancer Cells and their aggressive division and invasion traits.
• Connect to Experiment - The injected metastatic and non-cancerous cells in embryos facilitate the investigation of cellular behaviors.

• What is Zebrafish Embryo Xenografts and how it aids in studying cell invasiveness?
• What is the role of Perivitelline Space in these xenograft models?
• What difference in behavior can be expected between Metastatic Cancer Cells and Non-cancerous Cells?

• Practical Applications - Xenografts help in understanding cancer cell behaviors (e.g., invasiveness).
• Industry Impact - Such studies can guide developments in healthcare and cancer research.
• Societal Importance - Findings may result in better cancer treatments (e.g., combating malignancy).
• Scientific Advances -The methodology aids in real-time tracking of cell actions.