3-мерная культура клеток карциномы легкого: метод изучения клеточно-матриксных взаимодействий

- Сначала разморозьте флаконы матрицы базальной мембраны при температуре 4 градуса Цельсия на ночь. Матрикс базальной мембраны состоит из белков, присутствующих в микроокружении опухоли, которые помогают поддерживать характеристики раковых клеток in vitro. На следующий день поместите флакон с базальной мембраной на лед, чтобы сохранить матрицу в жидком состоянии. Возьмите клетки рака легких в предварительно охлажденную центрифужную пробирку и центрифугируйте при температуре 4 градуса Цельсия. Аспирируйте надосадочную жидкость и легкими постукивающими движениями, чтобы выбить гранулу и положить ее на лед. Далее добавьте в эту пробирку соответствующий объем смеси базальной мембраны и перемешайте, чтобы получилась равномерная клеточная суспензия. Выполняйте все действия при низкой температуре, чтобы предотвратить образование базальной мембраны.

Перенесите соответствующий объем суспензии ячеистой матрицы в центр каждой лунки в предварительно охлаждаемую луночную пластину, охватывающую всю лунку. Инкубируйте луночную пластину, чтобы матрица застыла. Исследуйте под микроскопом, чтобы убедиться в равномерном распределении клеток внутри матрицы. Добавьте в каждую лунку готовую среду для 3D