Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 5:38 мин. • April 30th, 2023
- Для начала поместите клетки рака легких в Т-образную колбу, содержащую питательную среду для тканей, и дайте ей вырасти в течение ночи. Далее суспендируйте микроРНК с трансфективным агентом в трансфективную среду. Удалите среду и добавьте трансфицирующую среду, которая будет вводить микроРНК в раковые клетки. МикроРНК — это некодирующая молекула РНК, которая связывается с комплементарной последовательностью мРНК и блокирует экспрессию генов. Инкубируйте колбу в течение желаемого времени.
Затем замените среду средой для тканевых культур и выращивайте в течение ночи. Добавьте трипсин для диссоциации клеток. Переложите смесь в центрифужную пробирку, содержащую PBS, и центрифугируйте ее. Удалите надосадочную жидкость и добавьте буфер для лизиса к клеткам лизиса и добавьте ультрачистый этанол для осаждения. Поместите смесь в разделительную колонку для очистки нуклеиновой кислоты и центрифугируете.
Удалите сквозной поток и добавьте промывочный буфер для удаления лизированной клеточной мембраны и центрифугу. Снимите промывочный буфер и добавьте ДНКазу с буфером для разложения ДНКазы, чтобы удалить ДНК из образца и центрифуги. Добавьте буфер для подготовки РНК для выделения РНК и центриф
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео