Микрочип антител: метод изучения экспрессии белка клеток рака легких, обработанных микроРНК

0 views • 3:02 min • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- Начните с добавления раствора биотина и меченого буфера в образец белка. Инкубируйте для облегчения прикрепления биотина к белкам. Добавьте стопорный реагент и вихрь. Затем поместите предметное стекло микрочипа антител в чашку, содержащую блокирующий реагент, чтобы предотвратить неспецифическое связывание антител. Промойте предметное стекло двойной дистиллированной водой, чтобы удалить блокирующий раствор. Поместите предметное стекло микрочипа в камеру. Смешайте образец биотинилированного белка с раствором для связывания и добавьте на предметное стекло, чтобы облегчить связывание целевых белков с соответствующими антителами. Переложите предметное стекло в чашку с буфером для мытья и замените буфер водой двойной дистилляции. Затем поместите предметное стекло в буфер для детектирования, содержащий флуоресцентно меченный стрептавидин, чтобы способствовать его связыванию с биотинилированными белками.

Инкубируйте блюдо в темноте, чтобы поддерживать интенсивность флуоресценции. Снимите предметное стекло и поместите его в сканер микрочипов. Сканер ищет флуоресцентные сигналы от стрептавидина, связанного с целевым белком. Основываясь на интенсивности флуоресценции, программное обеспечение анализирует степень экспрессии белка. В следующем протоколе мы выполняем микрочип антител для анализа изменений в экспрессии генов, связанных с клеточным циклом.

- Этот эксперимент направлен на выявление всех изменений экспрессии белков клеточного цикла с помощью обработки микроРНК. Соберите образцы белка в соответствии с процедурой, описанной в разделе трансфекции, и количественно оцените с помощью анализа BCA. Снимите предметные стекла с минус 4 градусов Цельсия за час до эксперимента, чтобы довести до комнатной температуры и удалить влагу. Возьмите 70 микрограмм образцов белка и подготовьте образцы слайдов в соответствии с инструкцией производителя, которая также пошагово описана в текстовом разделе.

Здесь следует отметить, что правильная промывка горок сверхчистой деионизированной водой является еще одним важным шагом, так как это поможет уменьшить фон горки. Кроме того, в этом эксперименте очень важно не пересушить предметные стекла до финального этапа. Наконец, отсканируйте предметное стекло с помощью микрочипа и проанализируйте данные.

13:21

Химически заблокирован антител Microarray для мультиплексный высокой пропускной профилирования конкретных гликозилирования белков в сложных образцов

Related Videos

0 Views

06:26

Анализ зависимой от разрыва связи переноса miRNA с помощью 3D-FRAP-микроскопии

Related Videos

0 Views

06:01

Внеклеточный протеин технология Microarray для высокой пропускной способности обнаружения низкого сродства рецептор лиганд взаимодействий

Related Videos

0 Views

07:04

Выполнение пользовательских Эксперименты Microarray микроРНК

Related Videos

0 Views

15:17

Колоректального рака на поверхности клеток белков профилировки с Microarray антитела и флуоресценции мультиплексирования

Related Videos

0 Views

16:24

Профилирование Эстроген-регулируемых микроРНК в клетках рака молочной железы

Related Videos

0 Views

10:16

Генерация двухцветного Antigen микрочипов для одновременного определения IgG и IgM Аутоантитела

Related Videos

0 Views

08:14

МикроРНК основе жидкого биопсия: Опыт плазмы Мирна подпись классификатора (MSC) для скрининга рака легких

Related Videos

0 Views

07:07

МикроРНК легких профилирования через эстральный цикл в подвергшихся воздействию озона мышей

Related Videos

0 Views

11:44

Анализ комбинаторной Мирна процедуры регулируют клеточный цикл и ангиогенез

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026