ПЭТ/КТ на основе ФДГ: метод использования радиоактивного индикатора для неинвазивной визуализации метаболизма опухоли

-- Опухолевые клетки проявляют высокую гликолевую активность. Радиоиндикаторы, такие как фтордезоксиглюкоза F18 (ФДГ), являются аналогами глюкозы, используемыми для наблюдения за раковыми тканями. Во-первых, измерьте затухание радиоактивности раствора ФДГ в калибраторе дозы. Наберите раствор ФДГ в инсулиновый шприц и поместите в держатель свинцового шприца. Поместите мышь в теплое место, чтобы предотвратить активацию бурой жировой ткани. Активированная бурая жировая ткань приводит к большему поглощению ФДГ. Обезболите мышь в течение двух минут и перенесите ее в ограничитель. Уколите хвост и измерьте уровень глюкозы в крови. Гипергликемия может привести к снижению поглощения ФДГ легкими.

В теплых условиях продезинфицируйте и раскройте хвостовую жилу мыши. Введите раствор ФДГ. Переместите мышь внутрь анестезиологической камеры для системного распределения ФДГ. Внутри раковой клетки гексокиназа превращает ФДГ в фосфат ФДГ-6, который не может метаболизироваться дальше, таким образом, накапливается внутри клетки. Закрепите мышь в лежачем положении под наркозом в камере визуализации. Выполните визуализацию ПЭТ/КТ. После визуализации дайте мыши восстановиться в клетке. Позитронная эмиссия F18 регистрируется во время ПЭТ-сканирования, в то время как компьютерная томография показывает рентгеновские изображения тканей. В следующем протоколе показана ПЭТ/КТ с ФДГ на моделях метаболически активного рака легких.

--осторожность. Используйте защитное снаряжение и соблюдайте все применимые нормативные процедуры при обращении с радиоактивностью. Начните с нагрева клетки мышей, которые будут визуализированы, при температуре 37 градусов Цельсия за час до инъекции фтордезоксиглюкозы, меченной фтором18. Это снижает потребление бурого жира индикатором. Взвесьте первую мышь и запишите ее вес. После обезболивания мыши с помощью утвержденного в учреждении метода проверьте глубину анестезии, зажав палец ноги. Если реакции не наблюдается, продолжайте процедуру, нанося офтальмологическую мазь на глаза, чтобы предотвратить сухость во время анестезии. Осторожно разведите меченный фтордезоксиглюкозой фтордезоксиглюкозу, который имеет 109-минутный период полураспада, в стерильном физиологическом растворе при скорректированной концентрации инъекции от 70 до 75 микрокюри на 100 микролитров.

Затем наберите 100 микролитров в инсулиновый шприц с помощью иглы 28 калибра и измерьте дозу радиоактивности с помощью калибратора дозы. Запишите измерение и время измерения, чтобы определить поправку на затухание. Поместите шприц в держатель для свинцового шприца. Для инъекции сначала прогрейте хвост в течение 1-2 минут марлей, смоченной в теплой воде. А затем протрите 70% изопропанолом для расширения хвостовой вены, непосредственно перед инъекцией. Ввести весь объем в шприце с помощью болюсного впрыска через боковую хвостовую вену и записать время инъекции. Затем измерьте оставшуюся дозу в шприце с помощью калибратора дозы и запишите измерение и время.

Наконец, поместите введенную мышь в анестезиологическую камеру с 1,5-2% изофлураном при температуре 37 градусов Цельсия, чтобы зонд мог распределяться через системный кровоток мыши в течение одного часа до ПЭТ-сканирования. Через час поместите первую мышь в камеру визуализации, установленную при температуре 37 градусов Цельсия, под носовой конус изофлурановую анестезию и закрепите ее конечности на месте медицинской лентой в положении лежа на спине. Поместите камеру визуализации в сканер ПЭТ/КТ и получите снимки ПЭТ и КТ, как описано в руководстве по использованию сканера ПЭТ/КТ. После завершения ПЭТ/КТ извлеките мышь из камеры визуализации и дайте ей восстановиться в клетке.