Иммунофлуоресцентный анализ: метод идентификации опухолевых клеток, захваченных на медицинской проволоке

- Возьмем функционализированную проволоку с небольшим золотым участком, покрытым гидрогелем, в сочетании с антителами, представляющими интерес. Опустите золотую часть проволоки во флакон, содержащий опухолевые клетки. Закройте его проволочным стопором, и инкубируйте в ротаторе для трубок. Циркулирующие опухолевые клетки или ЦОК, отображающие поверхностные антигены, связываются с антителами на проволоке. Промойте проволоку, погрузив во флаконы, содержащие фосфатно-солевой раствор или PBS, и высушите на воздухе. Теперь опустите проволоку в раствор ацетона, чтобы зафиксировать клетки, обезвожив их.

Затем аккуратно вставьте проволоку через наконечник P200 с функциональной частью внутри него. Заполните ленту антителом, конъюгированным с флуорохромом, чтобы погрузить проволоку. Эти меченые антитела будут связываться с соответствующими антигенами, присутствующими на клетках. Запечатайте отверстие лабораторной пленкой и выдержите ночь в темноте при температуре 4 градуса Цельсия. Затем промойте проволоку PBS, чтобы удалить все несвязанные антитела. Поместите провод в держатель для проводов и рассматривайте под флуоресцентным микроскопом. ЦОК, связанные антителами, флуоресцируют на проволоке