Экстракция микроРНК: метод извлечения микроРНК из образца плазмы

- МикроРНК, или микроРНК, — это небольшие некодирующие РНК, участвующие в регуляции генов. Их экспрессия изменяется во время рака и, следовательно, является потенциальными биомаркерами рака. Чтобы начать выделение микроРНК, возьмите только что собранный образец цельной крови и центрифугируйте при температуре 4 градуса Цельсия, чтобы отделить плазму от клеток крови. Перенесите надосадочную жидкость в свежую пробирку и снова центрифугируйте для получения более прозрачной плазменной надосадочной жидкости. Извлеките надосадочную жидкость, обработайте охлажденным раствором гомогенизации, а затем добавьте буфер для лизиса для гомогенизации образца. Добавьте раствор фермента протеиназы К для разрушения белков, особенно нуклеаз, которые в противном случае переварили бы РНК на последующих стадиях.

- Затем загрузите лизат в предназначенную для этого лунку предварительно собранного картриджа для извлечения нуклеиновых кислот. Добавьте раствор ДНКазы 1 в соответствующую лунку, чтобы устранить геномную ДНК из образца. Добавьте воду без нуклеаз в элюирующую трубку, собранную на картридже, для кондиционирования перед выделением микроРНК. Загрузите картридж в сборе в экстрактор нуклеиновых кислот.