Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 5:29 мин. • April 30th, 2023
- Возьмите функционализированный провод с прикрепленными на его поверхности клетками и окрашенными иммунофлуоресцентным окрашиванием. Промойте его ледяным физиологическим раствором цитрата натрия или раствором SSC. Поместите провод в микротрубку, содержащую щупы с флуоресцентными метками, и закройте ее проволочным стопором. Инкубируйте микротрубку в темной влажной камере в гибридизационной печи при температуре 75 градусов Цельсия для денатурации ДНК внутри клеток.
Перенесите камеру в духовку при температуре 37 градусов Цельсия, чтобы зонды связались с комплементарной последовательностью на ДНК. Далее вынимаем камеру из духовки и вынимаем проволоку. Опустите проволоку в трубку, содержащую раствор SSC нужной температуры. Промойте провод раствором SSC, содержащим Tween, чтобы удалить неспецифические или частично гибридизованные зонды, и снова промойте в дистиллированной воде.
Высушите проволоку и инкубируйте функционализированный наконечник в растворе DAPI, чтобы окрашивать ядра клеток. Промойте провод в PBS и высушите на воздухе. Поместите провод под флуоресцентный микроскоп. Зонд, гибридизированный с интересующим геном, выглядит как флуоресцентное пятно в ядрах клетки. В следующем п
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео