Консервация тканей с фиксированным формалином парафином (FFPE): метод изучения морфологии тканей

- Сначала поместите срез ткани на фильтровальную бумагу, смоченную PBS, чтобы предотвратить уменьшение или набухание клеток за счет балансировки осмолярности. Перенесите ткань в гистокассету. Закройте и поместите кассету в нейтральный буферизованный формалин, раствор NBF. NBF содержит формальдегид, который связывается с аминогруппами аминокислот и предотвращает образование муравьиной кислоты, которая пигментирует ткани. Оставьте кассету на ночь при низкой температуре, которая препятствует деградации нуклеиновых кислот и фиксирует ткань. Обезвоживайте ткани с помощью многократных смываний спиртом.

Поместите его в жидкий парафин и прижмите ко дну формы. Снимите груз и поместите дно гистокассеты на ткань. Насыпьте на сборку жидкий парафин. Дайте установке застыть на холодной пластине. Парафин нерастворим в воде, а после попадания в обезвоженную ткань затвердевает и помогает при рассечении. Перенесите тканевый блок на микротом. Разрежьте и соберите тонкие срезы ткани на предметном стекле. Если срез слишком толстый, кислород и другие питательные вещества не могут диффундировать по срезу, создавая ложный градиент некроза. Если сечение слишком тонкое, то оно имеет тенденцию к завивке. В в