Стимуляция Т-клеток ex vivo при опухоли поджелудочной железы: метод увеличения продукции цитокинов в Т-клетках

- Активированные Т-клетки перемещаются в микроокружение опухоли поджелудочной железы, где они высвобождают цитокины, такие как интерферон-гамма, или ИФН гамма, и фактор некроза опухоли-альфа, или ФНО-альфа, который помогает опосредовать эффективный противоопухолевый ответ. Поскольку цитокины быстро выходят из Т-клеток, внутриклеточные уровни могут быть неопределяемыми. Таким образом, Т-клеткам требуется стимуляция для увеличения продукции базальных цитокинов для изучения их терапевтической роли в опухоли.

Начните со взятия суспензии опухолевых клеток из поджелудочной железы мыши. Теперь обработайте Т-клетки, присутствующие в клеточной суспензии, коктейлем для стимуляции цитокинов и инкубируйте смесь в течение желаемого времени. Этот коктейль способствует высвобождению ионов кальция из эндоплазматического ретикулума в цитоплазму. Высокий уровень кальция, в свою очередь, активирует определенные ядерные факторы транскрипции, что приводит к увеличению выработки цитокинов в Т-клетках.

Затем обработайте клетки коктейлем из ингибиторов транспорта белка и инкубируйте трубку. Этот коктейль блокирует транспорт цитокинов из эндоплазматического ретикулума в комплекс Гольджи, что приводит к нак