Визуализация динамики кальция в клетках поджелудочной железы: метод изучения изменений концентрации цитозольного кальция в островках поджелудочной железы в режиме реального времени

- Островки поджелудочной железы представляют собой скопление гормонопродуцирующих клеток поджелудочной железы, которые играют решающую роль в поддержании гомеостаза глюкозы. Повышенная концентрация глюкозы вызывает закрытие ионных каналов калия, препятствуя оттоку ионов калия, что приводит к деполяризации мембраны. Как следствие, потенциал-зависимые ионные каналы кальция открываются, обеспечивая приток ионов кальция. Эта повышенная концентрация цитозольного кальция стимулирует высвобождение гормонов, таких как инсулин. В режиме реального времени, чтобы отобразить динамику цитозольного кальция, перенесите несколько островков, загруженных подходящим индикаторным краителем кальция, между распорными стенками предварительно собранной мелкой сетки.

Расположите сетку вверх ногами на покровном стекле, установленном внутри камеры изображения инвертированного микроскопа. Поместите грубую сетку и груз для обездвиживания ячеек. Добавьте в камеру раствор для визуализации. Далее настройте систему перфузии для введения глюкозы или тестируемого гормона, который представляет интерес. В клетках предварительно загруженные флуоресцентные индикаторы кальция сообщают о любом увеличении концентрации цито