Трансплантация опухоли ортотопическим гомотрансплантатом: метод создания мышиных моделей опухолей поджелудочной железы

- Во время трансплантации опухоли ортотопическим гомотрансплантатом опухолевые клетки или фрагменты опухоли от ракового донора пересаживаются реципиенту, принадлежащему к тому же виду, в орган или участок, который соответствует гистотипу опухоли. Начните с приема обезболиваемой донорской мыши, несущей опухоль, содержащей клетки поджелудочной железы. Простерилизуйте эту область и хирургическим путем извлеките опухоль. Промойте ткань, чтобы удалить кровь и измельчите ее на осколки. Затем поместите мышь-реципиента, находящуюся под наркозом, в правильное боковое положение и простерилизуйте ее брюшную полость. Обнажить селезенку хирургическим путем.

Далее аккуратно вытяните часть поджелудочной железы из-под селезенки. Поместите фрагмент опухоли на поджелудочную железу и зашите их вместе. Закройте брюшную полость и дайте мышке восстановиться в клетке. Ежедневно наблюдайте за мышью-реципиентом, чтобы наблюдать за ростом ортотопической опухоли поджелудочной железы. В следующем протоколе мы покажем ортотопическую трансплантацию гомотрансплантата протоковой аденокарциномы поджелудочной железы от донорской мыши C57 black 6 в поджелудочную железу мыши-реципиента C57 black 6.

- Контролируйте массу тела мышей C57 black 6 с помощью весов. Кроме того, контролируйте объем опухоли у мышей-доноров с опухолями с помощью штангенциркуля. После эвтаназии животного в капюшоне в соответствии с протоколом стерилизуйте кожу вокруг опухоли с помощью мазков йодофора. После хирургического удаления опухоли, как подробно описано в текстовом протоколе, поместите опухоль в чашку Петри, содержащую 20 миллилитров PBS, которые были предварительно охлаждены до четырех градусов Цельсия. Если есть загрязняющая кровь, перенесите опухоль в другую чашку Петри, и промойте опухоль PBS.

Разрежьте опухоль пополам. Удалите лишнюю кожу, сосуды, кальциноз и/или некроз. Выберите только неповрежденные кусочки опухоли и поместите их в стерильную 50-миллилитровую центрифужную пробирку. Добавьте 20 миллилитров PBS перед транспортировкой трубки в отдельное помещение для животных для фармакологических исследований. Чтобы подготовиться к ортотопической имплантации, зафиксируйте полностью обезболенную мышь на экспериментальной доске в правильном боковом положении. Продезинфицируйте кожу вокруг селезенки йодом, а затем дейодируйте 75% этиловым спиртом.

Найдите среднюю точку селезенки и сделайте вертикальный разрез в один сантиметр на животе, чтобы обнажить селезенку. Аккуратно вытяните часть ткани поджелудочной железы под селезенкой с помощью пинцета с плоским концом и сшите кусочек опухоли мышиного гомотрансплантата от семенной мыши на поджелудочную железу мыши-реципиента с помощью рассасывающегося хирургического шва 9-0. Закройте живот шелковым швом 6-0 двойным швом. Достижение гомеостаза за счет компрессии.

После окончания имплантации опухоли держите животных в теплой клетке до тех пор, пока не произойдет кровотечения или утечки опухолевой ткани. Наблюдайте за животным до тех пор, пока оно не придет в сознание, достаточное для поддержания лежачего положения на грудине. Верните животное в помещение для животных после полного восстановления после анестезии. Наблюдайте за мышами-носителями опухолей, пальпируя брюшную полость возле селезенки, и выберите мышей с ортотопическими опухолями.

• Orthotopic Homograft Transplantation - Procedure of transplanting tumor cells from a donor to a same species recipient at a corresponding organ.
• Pancreatic Cancer Homograft Models - Scientific models used for studying pancreatic cancer by transplanting tumor homografts.
• Orthotopic - Refers to the transplantation of cells or tissues into their natural site of occurrence in the body.
• Tumor Homograft Models - Research models involving the transplantation of tumor tissues between same-species subjects.
• Mouse Cancer Models - Laboratory mice bred or genetically engineered for use in cancer research.

• Introduce Orthotopic Homograft Transplantation – This procedure involves transplanting tumor cells from a donor to a same species recipient (e.g., mouse tumor).
• Key Concepts – Pancreatic Cancer Homograft Models allow us to study pancreas cancer progression (e.g., tumor mouse models).
• Underlying Mechanisms – Transplantation is done at matching organ site for accurate reflection of cancer progression.
• Connect to Experiment – The procedure mentioned is used to establish a mouse model for studying pancreatic cancer progress.

• Practical Applications – Allows for accurate representation of cancer progression enhancing research (e.g., tumor mouse model).
• Industry Impact – Impact on medical and biotechnological sectors (e.g., healthcare).
• Societal Importance – Enhances understanding of cancer which could lead to better treatments (e.g., health).
• Link to Scientific Advancements – Establishes a platform for scientific research and innovations in cancer treatment.