Анализ внеклеточного потока в 3D-сфероидах: метод измерения метаболической активности сфероидов опухолей поджелудочной железы

- Раковые клетки поджелудочной железы взаимодействуют с ассоциированными с раком фибробластами в опухолевом микроокружении или TME. Эти взаимодействия модулируют метаболическую активность раковых клеток и влияют на прогрессирование рака.

Сфероиды – это клеточные агрегаты, которые повторяют ТМЭ in vitro. Таким образом, мы можем использовать эти сфероиды для проверки изменений метаболических функций опухоли с помощью анализа внеклеточного потока. Этот анализ измеряет внеклеточную концентрацию кислорода и протонов для определения аэробного и гликолитического метаболизма соответственно.

Начните с получения 3D-сфероидов соответствующего размера, полученных путем совместного культивирования клеток рака поджелудочной железы с фибробластами поджелудочной железы. Теперь перенесите сфероиды в планшет для анализа потока и накройте его сенсорным картриджем, содержащим исследуемые препараты. Проведите анализ на анализаторе внеклеточного потока.

Анализатор флюса пневматически вводит исследуемые препараты из картриджа датчика на пластину для анализа в определенные моменты времени. В ответ на испытуемые препараты клетки выделяют протоны и кислород в микрокамеру пластины, а флуорофоры, присутствующ