Флуоресцентная ортотопическая модель мыши: имплантация GFP-экспрессирующих раковых клеток мышам для оценки прогрессирования опухоли in vivo

- Раковые клетки, экспрессирующие зеленый флуоресцентный белок или GFP, позволяют контролировать рост опухоли и метастазирование с помощью неинвазивной оптической визуализации. Обычно мы имплантируем эти клетки в ортотопическую модель, которая позволяет воссоздать микроокружение опухоли и имитировать взаимодействие опухолевых клеток с окружающей средой.

Начните с того, что положите мышь под наркозом на теплую грелку. Теперь вставьте его нос в носовую маску, чтобы обеспечить его кислородом и изофлураном, анестетиком. С помощью ножниц сделайте небольшой надрез и разрежьте ткань. Аккуратно вытяните селезенку вместе с поджелудочной железой и найдите хвост поджелудочной железы.

Загрузите в шприц суспензию флуоресцентных раковых клеток и аккуратно введите ее в хвост поджелудочной железы. В месте введения появляется поверхностный пузырь, подтверждающий успешную имплантацию. Поместите органы обратно в полость тела и закройте разрез стерильным швом. Теперь верните мышь в клетку и следите за ней до выздоровления.

По истечении желаемой продолжительности поместите мышь в камеру визуализации и сделайте снимки. Луч света попадает на раковые клетки и возбуждает GFP, который, в свою очередь, произ