Создание экспериментальной модели метастазов на мыши: имплантация GFP, экспрессирующих органоидные клетки CRC, в модель PDX для обнаружения микрометастазов

- Микрометастазы — это небольшая группа раковых клеток, которые выделяются из первичной опухоли и распространяются в различные части тела через кровь или лимфатические узлы. Чтобы обнаружить микрометастазы, суспензируйте органоидные клетки колоректального рака в PBS для поддержания pH и загрузите клеточную суспензию в шприц. Затем поместите мышь под наркозом в положение лежа на хирургической кровати. Сделайте небольшой надрез с помощью ножниц на нижней части левого бока и обнажите селезенку. Аккуратно вытяните селезенку с помощью пинцета и медленно введите клеточную суспензию в селезенку. Закройте разрез с помощью швов и верните животное в клетку. Следите за ним, пока он не восстановится.

По истечении нужного периода инъекции пожертвуйте мышью для рассечения первичных опухолей и разных тканей. Наблюдайте за рассеченными тканями под флуоресцентным микроскопом. У GFP-экспрессирующих раковых клеток развивается первичная опухоль в месте инъекции в селезенке. Несколько раковых клеток из первичной опухоли перемещаются в другой орган, обычно в печень, чтобы образовать микрометастатические колонии. В следующем протоколе мы создадим экспериментальную мышиную модель метастазов из GFP-экспрес