Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 5:19 мин. • April 30th, 2023
- Начните с создания мыши, находящейся под наркозом условного мутанта с модифицированным геномом, несущим специфические последовательности распознавания фермента Cre-рекомбиназы, называемые вставками LoxP, которые фланкируют желаемый ген-супрессор опухоли, подлежащий мутации. Хирургическим путем обнажают брюшную полость. Найдите дистальный отдел ободочной кишки и зажмите его верхнюю часть. Трансанально введите трубку медицинского назначения и продвигайте ее в дистальный отдел толстой кишки. Промойте толстую кишку физиологическим раствором, чтобы удалить каловые массы. Замените трубку. Зажмите нижнюю область толстой кишки для сегментации. Надуйте сегмент с помощью подходящего раствора для диссоциации клеток. Это перфорирует слизистый барьер и повышает доступность клеток крипты кишечника. Промойте раствор диссоциации.
Далее введите аденовирусную суспензию в сегмент толстой кишки. Эти сконструированные вирусные векторы кодируют ферменты Cre-рекомбиназы. Вирус проникает в клетку, высвобождает свою ДНК в ядро и экспрессирует ферменты. Белки распознают вставки LoxP в геноме хозяина и катализируют сайт-специфическую рекомбинацию, тем самым инактивируя ген-супрессор опухоли. Эта мутация с
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео