Создание органотипических полнокожных реконструкций: процедура создания 3D-модели кожи с использованием образцов кожи человека

Кожа в основном состоит из верхнего эпидермального слоя и нижнего дермального слоя. Эпидермальные клетки расслаиваются на несколько слоев, начиная от наименее дифференцированных клеток, присутствующих в основании, и заканчивая высокодифференцированными клетками на периферии. Чтобы вырастить ткань кожи, имитирующую морфологические и биохимические аспекты нормальной кожи, мы можем создать органотипическую модель кожи.

Для начала возьмите многолуночный планшет с мембранным вкладышем. Добавьте во вставку дермальные фибробласты, смешанные с коллагеном. Инкубируйте для облегчения затвердевания коллагенового матрикса, чтобы внедрить фибробласты и имитировать дермальный отсек кожи.

Далее добавьте суспензию клеток кератиноцитов поверх дермального слоя. Инкубируйте планшет, чтобы позволить кератиноцитам прилипнуть к дермальному компартменту. Дополните культуру средой для эпидермализации, чтобы инициировать пролиферацию кератиноцитов и формирование эпидермального слоя.

Наконец, переложите вкладыши в свежую многолуночную пластину. Добавьте среду для расслоения таким образом, чтобы она покрывала только основание конструкции, тем самым создавая границу раздела воздух-жидкость. После инкубации во