Анализ подкожной трансплантации: метод трансплантации клеток меланомы от донора к модели реципиентной рыбки данио-рерио

- Во время анализа на трансплантацию меланомы раковые клетки из рыбок данио-рерио, несущих опухоль, трансплантируются в модель реципиента с ослабленным иммунитетом для изучения развития опухоли. Начните с того, что возьмите усыпленную донорскую рыбку данио-рерио, несущую опухоль, и хирургическим путем удалите опухоль из ее тела. Перенесите опухоль в чашку Петри, содержащую подходящий буфер, и измельчите ее на мелкие кусочки.

Далее растирают фрагменты опухоли с помощью пипетки. При этом фрагменты опухоли диссоциируются на отдельные клетки. Теперь загрузите суспензию опухолевых клеток в шприц. Затем подготовьте реципиента с ослабленным иммунитетом рыбку данио Каспер на фильтровальной бумаге. Этот мутантный вариант данио-рерио с дефицитом пигментации не имеет меланоцитов и иридофоров, что делает его прозрачным и универсальным для экспериментов по визуализации и трансплантации.

Затем введите предварительно загруженную суспензию клеток меланомы подкожно в область над брюшной полостью, на полпути между задним мозгом и спинным плавником рыбки данио Каспера. Теперь перенесите рыбу-реципиента в воду и наблюдайте за ней, чтобы наблюдать за развитием опухоли. Прозрачное тело рыбок данио помог