Определение сотовый номер при использовании культуры клеток Счетчик скипетр сотовый

Счетчик клеток со скипетром — это портативное автоматизированное устройство для подсчета клеток, мониторинга диаметра и объема клеток, а также проверки здоровья и качества клеточных популяций. Он обладает значительными преимуществами по сравнению с другими методами подсчета, включая повышенную точность, простоту использования и низкую стоимость подсчета ячеек. Используя скипетр, следуйте инструкциям на его графическом дисплее, чтобы аспирировать клетки в одноразовый датчик.

Затем клетки подсчитываются, и устройство сообщает о концентрации клеток и статистике, которые можно загрузить на компьютер и проанализировать. Привет, меня зовут Соня. Я ученый-исследователь здесь, в Миллпорте, и сегодня я покажу вам, как пользоваться скипетром.

Подсчет клеток является необходимым, но утомительным этапом для культивирования клеток in vitro. Постоянные концентрации клеток обеспечивают экспериментальную воспроизводимость и точность. Подсчет клеток важен для мониторинга здоровья и скорости пролиферации клеток, оценки бессмертных или трансформационных клеток посева для последующих экспериментов, трансфекции или инфекции, а также подготовки к анализу на основе клеток, несмотря на необходимость скорости и точности.

При подсчете клеток 71% из 400 исследователей подсчитывали клетки с помощью гемоцитометра. Хотя гемоцитометрия недорога, она трудоемка и подвержена предвзятости пользователя и неправильному использованию, что приводит к неточным подсчетам. К источникам ошибок в гемоцитометрии относятся неравномерное распределение клеток в образце, слишком большое или слишком малое количество клеток в образце.

Субъективные решения о том, попадает ли данная ячейка в определенную область подсчета. Загрязнение гемоцитометра, изменение пользователем и изменение скорости заполнения гемоцитометра для облегчения скуки, связанной с ручным подсчетом. 29% исследователей подсчитывают клетки с помощью автоматизированных устройств подсчета клеток.

Тем не менее, для большинства исследователей цена, связанная с этими большими настольными инструментами, является препятствием для их использования. Счетчик ячеек со скипетром представляет собой автоматизированное портативное устройство, которое обеспечивает автоматизацию и точность подсчета котеров по относительно низкой цене в простом в использовании портативном формате. В системе используется принцип Котера для обнаружения частиц на основе импеданса в миниатюрном формате с использованием комбинации аналогового и цифрового оборудования для обработки чувствительных сигналов, хранения данных и графического отображения.

Одноразовый датчик спроектирован с микрозоной чувствительности клеток, которая позволяет различать по размеру и объему клетки при субмикронном и субпиколитровом разрешении, усиленном прецизионными каналами для работы с жидкостями и электроникой. Счетчик клеток со скипетром графически отображает статистику популяции клеток в виде гистограммы для использования. Счетчик клеток скипетра начинается с разбавления одноклеточной суспензии клеток в фосфатно-солевом буфере.

Оптимальной является концентрация от 10 000 до 500 000 клеток на миллилитр. Переложите 100 микролитров разведенных клеток в пробирку microview объемом 1,5 миллилитра. Включите счетчик ячеек со скипетром, нажав и удерживая переключатель на задней панели прибора, и дождитесь появления на экране инструкций.

При появлении запроса прикрепите датчик к концу скепетра так, чтобы сенсорная панель электродов была обращена к передней части инструмента. Датчики Scepter состоят из прецизионно отлитой пробоотборной камеры с электронной зоной считывания и встроенными чувствительными электродами ячейки. Датчики позволяют различать размер клетки при субмикронном разрешении и объем клетки при субпиколитровом разрешении.

Последовательное проектирование датчиков обеспечивает подсчет одинаковых объемов образцов и точное измерение размера. После подключения датчика выполняйте каждый этап процесса подсчета в соответствии с инструкциями на экране, как показано ниже. Когда экран считывает показания, удерживайте поршень, чтобы начать нажимать на поршень, затем экран считывает показания погружения датчика, погружения датчика в раствор суспензии ячейки и отпускания поршеня для аспирации суспензии ячейки в датчик.

Поршень действует как электрический сигнал и втягивает образец плюс мертвый объем в датчик. Скорость или точность погружения не имеет значения, как при пипетировании. Когда этот процесс будет готов, он займет несколько секунд.

Прибор издаст звуковой сигнал, и загруженный сэмпл отобразится на экране. После того, как образец загружен в датчик, он проходит через зону чувствительности для оценки размера и объема клетки. Затем, через микроканалы, как только подсчитывается 50 микролитров пробы, датчик сообщает прибору прекратить подсчет.

После завершения подсчета на экране прибора появится сообщение о завершении подсчета. Снимите датчик и выбросьте. Следуйте инструкциям, снимите и утилизируйте датчик.

Затем прибор отобразит на экране гистограмму размера или диаметра клеток, а также концентрацию клеток на миллилитр. После того, как подсчет будет завершен и гистограмма отобразится на приборе, примените стракции, нажав на кнопку-переключатель, выберите автоматическое стробирование или используйте последний, чтобы либо автоматически установить строб на основе профиля гистограммы, либо использовать строба из предыдущего подсчета. Независимо от выбора, ворота можно вручную перемещать в тонкое положение.

Настройте данные, нажмите кнопку переключения еще раз, чтобы выбрать левый ворота, и прокрутите переключатель, чтобы переместить ворота по своему усмотрению. Затем нажмите переключатель еще раз, чтобы активировать правые ворота, и прокрутите переключатель, чтобы установить правые ворота. Нажмите еще раз.

Будет отображена новая концентрация клеток, средний объем и диаметр клеток. Переключатель также может быть расположен с любой стороны для переключения дисплея между датой и временем, средним размером ячейки и средним объемом ячейки, до 72 гистограмм могут сохраняться на самом приборе. Чтобы загрузить данные на персональный компьютер, подключите прибор через порт USB-кабеля на экране дисплея на ПК.

Дважды щелкните по программному приложению со скипетром, чтобы запустить программу. Затем нажмите на «Подключить». Все подсчеты будут автоматически перенесены в программное обеспечение.

Прикладное программное обеспечение со скипетром отображает гистограмму с подробным описанием популяционного распределения культуры по объему или диаметру. Загруженные файлы затем можно экспортировать в Microsoft Excel, где исходные данные будут отображаться в ячейках указанного диаметра или объема ячеек. К подсчету подготавливали 19 различных клеточных линий и определяли теоретические начальные концентрации с помощью счетчика культеров.

Затем эти клеточные суспензии дополнительно разбавляли для получения клеточных суспензий при теоретических клеточных концентрациях. Затем для определения концентраций клеток со скипетром использовали счетчик клеток. На этом рисунке показаны пять разведений, которые были измерены для пяти репрезентативных клеточных линий, а также теоретическая концентрация клеток.

Высокая степень линейности, на которую указывают значения r-квадрат, демонстрирует, что подсчет со скипетром является надежным методом для клеточных линий, тестируемых в широком линейном рабочем диапазоне. Здесь показана общая относительная точность подсчета скипетров, в котором данные, полученные при подсчете скипетров, сравниваются с данными, полученными при подсчете котер. Логарифм количества клеток скипетра строится относительно логарифма подсчета котеров и показывает, что во всех исследуемых линиях количество скипетров совпадает с количеством котеров.

Подсчет 19 клеточных линий проводили с использованием счетчика Z с двумя сошниками. Счетчик клеток со скипетром, автоматизированный счетчик на основе зрения, такой как V-ячейки или система для тестирования счета, и подсчет гемоTER проводились в соответствии с инструкциями производителя с использованием той же начальной суспензии клеток и идентичных разведений. Результаты, показанные на этом рисунке, демонстрируют, что концентрации клеток, измеренные с помощью скипетра, близко соответствуют теоретическим концентрациям клеток с высокой линейностью.

Процентный коэффициент вариации или CV рассчитывали для каждого разведения каждой клеточной линии. Для каждой системы подсчета показан здесь средний процент CVS по 19 клеточным линиям по отношению к концентрации клеток и методу подсчета в рабочем диапазоне. Счетчик клеток скипетра более точен, чем подсчет гемоцитометра, отображая меньшие стандартные отклонения и меньшие средние коэффициенты вариации.

Подсчет со скипетром происходит в 10 раз быстрее, чем гемоцитометрия, а также быстрее, чем у других автоматических счетчиков. Здесь SF 9, MCF 7 и HC 2 93 клетки были подсчитаны с помощью методов, описанных в этом видео. Регистрировалось среднее время, необходимое для измерения концентрации клеток.

Отметим, что гемоцитометрия проводилась только один раз на образец. Scepter проводит измерения на основе размера клетки. Таким образом, любые изменения в клеточной морфологии могут быть зафиксированы на гистограмме.

Здоровые культуры демонстрируют красивое колоколообразное распределение Гаусса, в то время как нездоровые клетки встают и вызывают сдвиг гистограммы влево. Аналогичным образом, когда популяция из 50% мертвых клеток была смешана с 50% живых клеток, также наблюдались сдвиги гистограммы. Я только что показал вам, как использовать новый счетчик клеток со скипетром для многоплодия, который революционизирует способ подсчета клеток исследователями.