Физиологические Эксперименты с раков кишке: Упражнение Студенческая лаборатория

Общая цель данного доклада — стать учебным пособием для студентов старших классов и студентов старших курсов по физиологии, которые участвуют в физиологических экспериментах. Студенты учатся обнажать и записывать схватки в задней кишке рака. Следующим шагом является иссечение задней кишки животного, что позволяет непосредственно наносить составы.

Затем контролируют силу и ритм сокращений гладких мышц задней кишки при применении различных фармакологических средств для изучения механизмов, изменяющих силу сокращения. Получены результаты, показывающие действие модуляторов на нейронные внутренности или непосредственно на мышцы на основе фармакологических анализов и рецепторного субтипирования. Здравствуйте, я доктор Джей Мерсье с факультета биологических наук Университета Брока.

Я использовал заднюю кишку рака в качестве подготовки к проведению исследований нейротрансмиттеров, которые контролируют висцеральные мышцы. Я также использую эту подготовку в качестве учебного пособия, и в рамках сотрудничества с лабораторией доктора Робина Купера в Университете Кентукки мы совершенствуем ряд студенческих экспериментов для учебных целей. Этот метод может дать представление о функции висячего кишки рака.

Он также может быть применен в исследованиях заболеваний, таких как заболевания, связанные с перистальтическими ритмами. Он также может быть использован для описания механизмов, лежащих в основе модуляции мышечной и нервной иннервации. Студенты научатся интерпретировать физиологические и фармакологические данные с помощью фармакологических агентов, нейротрансмиттеров и нейрогормонов, а также получат общее представление о функции рецепторов.

Что касается агонистов и антагонистов, то учащиеся построят кривые зависимости зависимости от дозы и представят данные в графической форме для статистического анализа Чтобы обезболить животное, поместите на лед раку размером от 6 до 10 сантиметров на лед на 5-10 минут. Держите обезболенного рака из-за клешни одной рукой. Быстро разрежьте от глазницы до середины головы с обеих сторон, а затем обезглавьте рака.

Кровь от препарата будет липкой, когда он попробует, поэтому промойте инструменты по завершении. Далее отрежьте ноги и когти. Затем левый и правый хвостовые плавники, оставляя средний хвостовой плавник разрезать вдоль спинной стороны брюшка до тех пор, пока не будет достигнут последний сегмент.

Затем разрежьте вдоль последнего отрезка и вниз с другой стороны. Снимите спинной панцирь. Положите рассеченных раков в чашку Петри, выстланную сигаром.

Бедный соленый рак. Для покрытия препарата используются рассекающие штифты, которые крепят препарат к чашке Петри. Задняя кишка обычно окружена массой кровеносных сосудов и соединительной ткани.

Снимите их с помощью щипцов. Заботясь о том, чтобы не повредить кишечник. Задняя кишка теперь видна вдоль брюшной полости.

Дайте препарированному раку постоять в солевом растворе около 10 минут, чтобы он мог восстановиться после шока от вскрытия и воздействия солевого раствора. Следите за медленными перистальтическими сокращениями задней кишки. Для начала теперь можно рассчитать частоту схваток.

Подсчитайте количество схваток, которые происходят за 30 секунд, и запишите это в журнал. Также запишите тип возникающих сокращений и являются ли они перистальтическими или спастическими. Обратите внимание на направление любых перистальтических волн.

Подсчитайте частоту сокращений вблизи анального отверстия и посередине живота, посмотрите, есть ли разница в скорости между этими двумя областями. Подготовьте различные испытательные растворы и при той же температуре, что и солевой раствор для ванны. Первым решением, которое будет протестировано здесь, будет один микромолярный серотонин, полученный в солевом растворе раков.

С помощью пипетки удалите физиологический раствор из полости открытого брюшка раковой рыбы и нанесите раствор серотонина на заднюю кишку. Сразу после добавления нового раствора подождите 30 секунд, а затем подсчитайте 30 секунд сокращений в области возле ануса, а затем подсчитайте следующие 30 секунд сокращений в середине живота. Запишите эти цифры в таблицу, а также отметьте тип возникающих сокращений. Следующий.

Вылейте тестовый раствор из записывающей чашки и несколько раз промойте заднюю кишку обычным солевым раствором для раков. Затем промывайте препарат каждые 30 секунд в течение пяти минут. На этом этапе вы можете добавить следующий тестовый раствор, которым в этой демонстрации является один микромолярный топамин.

Запишите свои наблюдения, как и раньше, и повторите этот процесс для остальных испытуемых соединений. При использовании нескольких концентраций одного и того же вещества обязательно начинайте с самой низкой концентрации и переходите к более высоким концентрациям. Установка для измерения силы сокращений желудочно-кишечного тракта включает в себя ноутбук с программным обеспечением Lab Chart Seven, мостовую капсулу, силовую лабораторию, 26 Тл и преобразователь силы.

Прежде чем вы сможете измерить силу сокращений мышц ЖКТ, вам необходимо изолировать желудочно-кишечный тракт. Для этого отрежьте мышцы в последнем сегменте живота, поместите два или более булавок через мягкую вентральную кутикулу по обе стороны от ануса, затем отрежьте остальную часть живота, оставив заднюю кишку и анус прикрепленными к небольшому кусочку кутикулы. Кишка должна быть разрезана близко к месту соединения грудной клетки и брюшной полости.

Теперь переместите желудочно-кишечный тракт на неглубокую посуду с дном, покрытым саржем. Существует кровеносный сосуд, который проходит вдоль дорсальной стороны желудочно-кишечного тракта. Осторожно оттяните его от желудочно-кишечного тракта.

Влейте в препарат свежий солевой раствор для раков. Переместите преобразователь силы к препарированию. Внимательно посмотрите на штифт, который приклеен к нижней части преобразователя силы.

Конец, который цепляется за кишку, имеет небольшой изгиб. Зацепите небольшой изгиб булавки за отрезанный конец задней кишки. Зацепив заднюю кишку, слегка сдвиньте блюдо, пока задняя кишка не натянется.

Будьте осторожны с этим шагом, так как кишка должна быть тугой, но не слишком тугой. Слишком напряженная работа может повредить мышцу. Когда блюдо окажется в оптимальном положении, используйте воск или глину, чтобы удерживать блюдо в устойчивом положении.

Далее запустите программное обеспечение. Чтобы начать запись, откройте программное обеспечение для создания лабораторных диаграмм. Закройте лабораторную диаграмму, добро пожаловать в центр.

Перейдите в раздел «Настройка» в левом верхнем углу. Нажмите на настройки канала в левом нижнем углу. Измените настройки канала, чтобы иметь только один канал.

Нажмите кнопку «ОК» в правой части экрана. Перейдите на первый канал открытой капсулы моста. Установите диапазон на наиболее чувствительную настройку, в данном случае 200 микровольт в верхней части диаграммы в правом углу.

Установите количество циклов в секунду на 2K. Теперь вы готовы к записи. Нажмите «Пуск», чтобы убедиться, что настройка работает правильно.

Слегка коснитесь наконечника датчика пипеткой. Вы должны увидеть изменение силы, зафиксированное программным обеспечением. Нажмите «Стоп» на программе, затем нажмите «Пуск» и дайте программе запуститься.

В течение примерно 20 секунд нажмите кнопку «Стоп» и добавьте комментарий с меткой «Солевой раствор». Рассчитывайте скорость сокращений только путем измерения времени от начала одного прогиба до начала следующего или путем подсчета общего отклонения за минуту или две. Рассчитайте частоту как схваток в минуту или как схваток в секунду в зависимости от того, насколько быстро они происходят.

Чтобы измерить силу сокращений, используйте относительную меру для сравнения сокращений в различных условиях в сохраненном файле. Переместите маркер M к базовой линии, затем переместите курсор к пику отклонения и обратите внимание на значение, указанное в правом верхнем углу экрана. Это значение дельты, то есть разность от М до пика.

Обратите внимание, что курсор должен оставаться неподвижным на пике, чтобы измерить изменение. Затем переместите маркер M и курсор на следующую интересующую вас форму волны и повторите измерение, чтобы изучить действие модуляторов. На этом препарате медленно переключите физиологический раствор на тестовый раствор.

В этом случае один микромолярный серотонин, и продолжайте записывать скорость и силу сокращений в качестве последнего теста. Для этого препарата проверяют, изменяют ли ингибиторы щелевого соединения скорость или силу сокращений, ингибиторы щелевого соединения включают один гепэтанол или физиологический раствор, который был пузырчатым углекислым газом. Эти соединения используются в последнюю очередь, так как они могут повредить мышечные волокна после длительного воздействия, чтобы сравнить действие различных соединений, построить график данных на диаграмме.

Еще одним интересным применением этого препарата является запись силы, создаваемой круговыми мышцами. Однако, если вы применяли ингибиторы щелевого соединения к своему препарату, они могли повредить круговые мышцы, и в этом случае вам следует использовать свежий препарат задней кишки для тестирования круговых мышц. Чтобы обнажить круговые мышцы, разрежьте трубку кишки в продольной плоскости тонкими ножницами.

С помощью тонких булавок надежно прикрепите одну сторону к блюду. Прикрепите крючковатый штифт на преобразователе к другой стороне полосы. Подвергните препарат воздействию тех же соединений, которые были испытаны на продольных мышцах, соотношение между испытываемыми соединениями и количество и тип сокращений показаны здесь.

Вы можете построить график зависимости количества сокращений от времени для растворов физраствора, серотонина и глутамата. Вы можете изобразить на графике зависимость количества сокращений от силы сокращений в милливольтах для растворов глутамата серотонина с физиологическим раствором. Эти трансплантаты могут быть выполнены как для продольной, так и для круговой мышцы, чтобы проверить, проявляют ли продольные и круговые мышцы в разных областях кишечника различную реакцию на различные модуляторы.

Описанные выше эксперименты можно повторять на разных участках от анального отверстия и вверх по брюшной полости. Пытаясь выполнить эту процедуру, важно помнить о необходимости быть осторожным, чтобы не повредить желудочно-кишечный тракт пинцетом и не тянуть слишком сильно с помощью датчика силы После этой процедуры. Другие методы, такие как электрофизиологические, могут быть выполнены для решения других вопросов, таких как функции ионных каналов и модуляции, и которые могут служить моделью и другими тканями в других животных моделях.