Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:24 мин. • August 29th, 2025
Начните с мышки под наркозом на стереотаксической рамке с наклоненной головой.
Разрез кожи головы у мыши обнажает твердую мозговую оболочку, покрывающую большую цистерну, спинномозговую жидкость или заполненное спинномозговой жидкостью пространство между мозжечком и стволом мозга.
С помощью щипцов захватите твердую мозговую оболочку и создайте в ней небольшое отверстие для доступа к большой цистерне.
Используйте стерильный тампон для удаления излишков спинномозговой жидкости.
Определите анатомическую точку отсчета, где спинной мозг соединяется со стволом мозга, затем определите стереотаксические координаты.
Опустите стереотаксический кронштейн, держащий микропипетку, в которой находится терапевтический раствор.
Продвигайте микропипетку через большую цистерну в ствол мозга по заданным координатам.
Вводите раствор медленно и кратковременно удерживайте пипетку, чтобы предотвратить обратный поток.
Терапевтическое решение напрямую достигает ствола головного мозга и верхних отделов спинного мозга, до которых трудно добраться с помощью стандартных стереотаксических методов.
Посмотрите на дорсальную поверхность ствола мозга с подробными ориентирами через открытую твердую мозговую оболочку.
С помощью скошенных щипцов захватите твердую мозговую оболочку, идущую от затылочной кости к атланту, затем с помощью пружинных ножниц сделайте небольшое отверстие примерно от 0,5 до 1,5 миллиметра в твердой мозговой оболочке. Как только твердая мозговая оболочка будет вскрыта, слейте излишки спинномозговой жидкости с помощью стерильной ватной палочки. Обекс, точка, где центральный канал открывается в четвертый желудочек, является стандартной передне-задней и медиолатеральной нулевой точкой.
Приложите пипетку или шприц к цели с помощью стереотаксического кронштейна. Опустите плечо спинного на дорсальную поверхность, которая образуется из дорсовентральной нулевой точки. Затем опустите пипетку на ствол мозга и введите раствор.
Оставьте иглу на месте на одну-пять минут после инъекции, чтобы избежать следа иглы при использовании объемов от 3 до 50 нанолитров. Затем поднимите пипетку или шприц с помощью стереотаксического кронштейна и повторите это для нескольких целей.