Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:47 мин. • August 29th, 2025
Закрепите мышь в стереотаксической рамке с хирургически обнаженным мозгом, содержащим предварительно имплантированную сфероидную глиобластому.
Нанесите физиологический раствор на подвергшийся воздействию мозг для поддержания гидратации тканей.
Расположите гибкий зонд над солевым слоем, убедившись, что его контактные площадки лежат на спине мыши, а электроды расположены над глиобластомой.
Зонд состоит из тонкой гибкой полимерной подложки с узорчатыми золотыми электродами, покрытыми биосовместимым проводящим полимером, обеспечивающим оптимальные электрические характеристики и совместимость с тканями.
Впитайте излишки физиологического раствора, оставив только тонкий слой.
Нанесите силиконовый клей для стабилизации электродов, затем установите покровное стекло.
Нанесите стоматологический цемент вокруг покровного стекла и закрепите контактные площадки на спине мыши.
Постройте цементный колодец для введения жидкости.
Позже проведите послеоперационную анальгезию и поддерживайте тепловую поддержку для восстановления мыши.
Имплантированные электроды подают электрические импульсы над глиобластомой для целенаправленной терапии импульсным электрическим полем в нейротерапевтических приложениях.
Капните каплю DPBS, чтобы покрыть трепанацию черепа. Поместите гибкий электрод на каплю DPBS и аккуратно положите заднюю часть зонда с контактными площадками на заднюю часть мыши. Поглотите каплю DPBS небольшим листом бумаги до тех пор, пока зонд не сможет лежать на твердой мозговой оболочке и следовать за кривизной мозга, следя за тем, чтобы небольшой слой физиологического раствора оставался под электродами, чтобы действовать как барьер против перетекания клея.
Нанесите на щуп небольшую каплю силиконового клея и накройте его пятимиллиметровым круглым защитным стеклом. Нажмите на защитное стекло вниз до тех пор, пока силикон не распределится равномерно, а расстояние между защитным стеклом и щупом не станет минимальным. Затем подождите 30 секунд, чтобы силикон застыл.
Чтобы закрепить покровное стекло, быстро нанесите на его бока суперклей и придавите его вниз до тех пор, пока клей не станет твердым. Нанесите суперклей на горлышко зонда с помощью зубочистки, следя за тем, чтобы суперклей втянулся под горлышко, чтобы обеспечить стабильную поддержку. Покройте череп стоматологическим цементом, чтобы создать хроническую крышку, и будьте особенно осторожны, чтобы закрыть только края покровного стекла.
Поднимите заднюю часть зонда и нанесите цемент под горловину зонда. Оставшуюся часть зонда нанесите на цемент до того, как он затвердеет. Осторожно надавите на горлышко зонда, чтобы его поверхность находилась на одном уровне с покровным стеклом и не мешала объективу микроскопа во время эксперимента.
Покройте верхнюю часть шейки зонда слоем стоматологического цемента толщиной не более 1,5 миллиметра, чтобы обеспечить надежную фиксацию зонда. Постройте цементную скважину с 1,5-миллиметровым гребнем на расстоянии от одного до двух миллиметров вокруг покровного стекла, чтобы создать бассейн для иммерсионной жидкости для двухфотонной визуализации. После того, как цемент затвердеет, проведите послеоперационную анальгезию и согрейте животное до выздоровления, завернув его в бумажное полотенце и подложив к инфракрасной лампочке.