Введение терапевтического агента в мозг бодрствующего грызуна с помощью микроинъекций

Начните со стерильной установки для микроинъекций, наполненной водой, состоящей из шприца, соединенного с микроинъектором через пластиковую трубку.

Слегка втяните поршень шприца, чтобы в трубке образовался пузырь воздуха.

Погрузите наконечник микроинъектора в терапевтическое средство и потяните поршень для аспирации раствора.

Возьмем бодрствующую крысу с защитной головной колпачком и двумя предварительно имплантированными направляющими канюлями, вставленными в определенные целевые области мозга.

Прижмите грудь крысы к груди экспериментатора, чтобы свести к минимуму стресс.

Очистите область вокруг канюль стерильным раствором.

Вставьте наполненные лекарством микроинъекторы в направляющие канюли, чтобы добраться до целевых участков.

Запустите инфузию препарата и следите за его доставкой, отслеживая движение пузырьков.

Когда инъекция будет завершена, задержите ее ненадолго, затем извлеките микроинъекторы. Вставьте обтюраторы в канюли, чтобы предотвратить загрязнение.

Этот метод позволяет целенаправленно доставлять терапевтические агенты в мозг грызунов.

Оттяните поршень шприца назад на 0,2 микролитра, чтобы создать пузырь между стерильной водой и трубкой PE 20 и раствором, который нужно впрыснуть.

После этого поместите микроинжектор в реагент, который нужно впрыснуть, и медленно потяните поршень шприца к упору. Чтобы подготовить животное к инъекции, прижмите грудь крысы к груди экспериментатора. Очистите область вокруг канюли с помощью ватного аппликатора, смоченного в бетадине.

Промокните головную уборку три раза бетадином, а затем два раза проведите тампон с этанолом. Затем поместите заполненный микроинъектор в канюлю. Нажмите «Пуск» на микронасосе впрыска и следите за движением пузырьков.

Когда инъекция будет завершена, извлеките микроинъектор из канюли и замените его обтуратором.