Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:30 мин. • August 29th, 2025
Начните с неонатальной крысы под наркозом, помещенной на грелку с обнаженным седалищным нервом.
Приподнимите дистальный участок нерва и введите раствор плазмидной ДНК, смешанный с красителем. Краситель помогает отслеживать доставку плазмид.
Поместите электрод пинцетального типа вокруг нерва, сохраняя небольшой зазор между плечами электрода.
Введите в этот зазор физиологический раствор для проведения тока.
Подайте электрический импульс вокруг нервных волокон, который создает переходные мембранные поры в шванновских клетках. Затем поменяйте местами положение электродов и подайте второй электрический импульс. Это усиливает проникновение плазмидной ДНК через поры.
После электропорации клеточная мембрана повторно герметизируется и захватывает плазмиду.
Очистите участок, заклейте разрез кожи, продезинфицируйте его и дайте крысе восстановиться.
Позже плазмидная ДНК перемещается в ядро и интегрируется в ДНК шванновской клетки, обеспечивая успешный перенос генов.
Осторожно потяните дистальную сторону нерва с помощью иглы, чтобы приподнять оголенный нерв. Вставьте стеклянную микропипетку в дистальный участок нерва и введите раствор ДНК, слегка надавливая на него, пока нерв не станет зеленым. Затем п
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео