Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 1:59 мин. • November 28th, 2025
Начните с ночных культур штаммов Vibrio cholerae — патогенных бактерий, выращиваемых в богатой питательными веществами среде.
Центрифугуйте культуры для гранулирования клеток. Удалите супернатант, содержащий внеклеточные соединения, и снова суспензуйте гранулу в физиологическом растворе.
Затем окуните стерильный проволочный инокулятор в культуру и введите его вертикально в агар подвижности, чтобы отложить бактерии под поверхностью без бокового распространения.
Простерилизуйте инокулятор пламенем между сортами, чтобы предотвратить перекрёстное загрязнение.
Инкубировать пластину, чтобы бактерии могли мигрировать через агар-подвижность.
Агар содержит трифенилтетразолий хлорид (TTC) — редокс-индикатор, который при восстановлении метаболически активными клетками становится красным.
Подвижные штаммы снижают TTC на большой площади, образуя большую красную зону, тогда как неподвижные штаммы имеют пятна, ограниченное линией удара.
Размер и распространение красных зон указывают на подвижность каждого штамма.
Промой клеточную гранулу, полученную ночной культурой. Инокулируйте пластины агаров моторики, вставляя инокуляционный удар в промытую жидкую культуру, и вводите вертикально в среду.
Убедитесь, что укол для инокуляции не сгибается во время удара агаром. Между каждой прививкой стерилизуйте проволочный удар с помощью горелки Бунзена. Инкубировать тарелки крышкой вверх в течение 14-24 часов при 37 градусах Цельсия.
Через 14 часов внимательно следите за пластинами подвижности, чтобы предотвратить чрезмерный рост культур.