ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. Подготовка толстой ткани для GIMM <ol><li> Для подготовки сегменте дистальной толстой кишки для желудочно-кишечного тракта монитора подвижность (GIMM), первое место изолированной толстой кишки в ледяной раствором Кребса (121 мМ NaCl, 5,9 мМ KCl, 2,5 мМ CaCl 2, 1,2 мМ MgCl 2, 25 мМ NaHCO 3 , 1,2 мМ NaH 2 PO 4 и 8 мМ глюкозы; газированные с 95% O 2 / 5% CO 2). Убрать оставшиеся брыжейки от наружной стены и делают небольшой разрез в полости конца так что можно выделить, когда помещается в орган ванну. Примечание: ткань может оставаться в ледяной раствором Кребса на срок до 2 часов до эксперимента. </li><li> Далее, положение притока и оттока каналов в органе ванну, чтобы они находятся за пределами камеры поле, чтобы предотвратить вмешательство получения изображений. Постоянно заливать орган ванна с нагретого (37 ° С), кислород (95%, 5% СО 2) решение Кребса при скорости потока 10 мл / мин. </li><li> Отслеживание устной против анального концов, контактный сегменте дистальной толстой кишки (не менее 5 см) на обоих концах в органе ванну, позволяя небольшой степени распущенности, так что сегмент может свободно перемещаться до 1 см в середине . Оральный конец должен располагаться по отношению к исследователю для удобства размещения фекального гранул. Кишечное сегменты должны быть закреплены таким же образом, одним и тем же исследователем для каждого эксперимента в заданное множество экспериментов, поскольку длина и натяжение сегмента влияет на скорость пропульсивной моторики, с продольными растянуть снижение скорости транзита (Диксон и соавт. , 2007). </li><li> Разрешить подготовку, чтобы уравновесить, по крайней мере 30 мин. </li></ol> 2. Настройка GIMM и сбора данных <ol><li> В GIMM системы, толстого сегмента в перфузионной камере горит снизу. Цифровая видеокамера сопряжена с компьютером расположен над камерой. Убедитесь, что оба источника света освещение и GIMM программного обеспечения включены. </li><li> После установки нового эксперимента в GIMM прикладного программного обеспечения, начинают первый судебный процесс, вставив эпоксидным покрытием фекальных гранул в ротовую конце толстой сегменте инициировать перистальтику. Нажмите на камеру тумблер на компьютере, чтобы включить камеру и нажать на кнопку записи, чтобы начать запись. Движение гранул в анальном направлении регистрируется видеокамерой и цифровые фильмы хранятся на ПК для последующего анализа. Когда шарик достиг конца толстой сегмент, нажмите кнопку записи, чтобы остановить запись. </li><li> Для получения контрольного значения для скорости движения, начните с толстой сегмент от здорового животного и без применения лекарств. Поведение 3-5 испытания в одном подготовки, с периода восстановления 5 минут между каждым запуском. </li><li> Для определения воздействия определенных условий или препаратов на толстой моторику, выполнить 3-5 испытаний / подготовка к каждой экспериментальной состоянии. Кроме того, выполнять каждый эксперимент по крайней мере пять различных двоеточия, по крайней мере, пять различных животных. </li><li> При анализе цифровых кинофильмов, скорость движения гранул фекальные рассчитывается как время, необходимое для гранул для прохода X см толстой сегменте. </li></ol> 3. Строительство Пространственно-временные Карт <ol><li> Цифрового видео, приобретенные у отдельных бежит GIMM могут быть преобразованы в пространственно-временной карты с использованием специального программного обеспечения GIMM. </li><li> На горизонтальной оси, изменения в толстой диаметром построены с течением времени путем преобразования изображения из толстой кишки в каждом кадре видео, чтобы силуэт, и вычисления и преобразования диаметр по всей длине в серого. Конечным результатом является то, что гранулы и области релаксации кажутся черными, а области сокращения появляются белые. </li><li> Расстояние, пройденное гранул через двоеточие сегмент представлен на вертикальной оси. </li></ol> 4. Представитель Пространственно-временные Карт <ol><li> Здесь показаны представитель пространственно-временной карты, показывающие гранулы моторику толстой сегментов в соответствии с различными условиями эксперимента. У (вертикальной) оси представляет гранул положение во времени, тогда х (горизонтальной) оси откладывается расстояние, на которое гранул прогрессировала через двоеточие сегменте. <img src="/files/ftp_upload/2435/2435fig1.jpg" alt="Рисунок 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Рисунок 1"> </li><li> В пространственно-временной карте от контроля толстой кишки (без лечения, нормальное качество), осадок будет развиваться линейно со скоростью ~ 2 мм / сек. В противоположность этому, администрация некоторых лекарств или воспаление в толстой кишке может привести к нарушена моторика шаблонов, таких как остановить подвижность и препятствует подвижности. </li><li> Результаты GIMM можно показать в виде графиков, в которых оси ординат представляет собой расстояние в миллиметрах пройденное фекальных пеллет и оси Х время в секундах. Например, администрация DAMGO (D-Ala2, N-Me-Phe4, Gly-ol5),μ-опиатных рецепторов, приводит к снижению пропульсивной моторики в толстой кишке. </li></ol>

<ol><li>Bayliss, W. M., Starling, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+movements+and+innervation+of+the+small+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22J+of+Physiol+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">The movements and innervation of the small intestine.</a> J of Physiol (Lond). 24, 99-143 Forthcoming.</li>
<li>Dickson, E. J., Spencer, N. J., Hennig, G. W., Bayguinov, P. O., Ren, J., Heredia, D. J., Smith, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+enteric+occult+reflex+underlies+accommodation+and+slow+transit+in+the+distal+large+bowel%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">An enteric occult reflex underlies accommodation and slow transit in the distal large bowel.</a> Gastroenterology. 132, 1912-1924 (2007).</li>
<li>Foxx-Orenstein, A. E., Jin, J. G., Grider, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((5-HT4+receptor+agonists+and+delta-opioid+receptor+antagonists+act+synergistically+to+stimulate+colonic+propulsion%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">5-HT4 receptor agonists and delta-opioid receptor antagonists act synergistically to stimulate colonic propulsion.</a> Am J Physiol. 275, 979-983 (1998).</li>
<li>Grider, J. R., Foxx-Orenstein, A. E., Jin, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((5-Hydroxytryptamine4+receptor+agonists+initiate+the+peristaltic+reflex+in+human%2C+rat%2C+and+guinea+pig+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">5-Hydroxytryptamine4 receptor agonists initiate the peristaltic reflex in human, rat, and guinea pig intestine.</a> Gastroenterology. 115, 370-380 (1998).</li>
<li>Kadowaki, M., Wade, P. R., Gershon, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Participation+of+5-HT3%2C+5-HT4%2C+and+nicotinic+receptors+in+the+peristaltic+reflex+of+guinea+pig+distal+colon%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Participation of 5-HT3, 5-HT4, and nicotinic receptors in the peristaltic reflex of guinea pig distal colon.</a> Am J Physiol. 271, 849-857 (1996).</li>
<li>Krauter, E. M., Strong, D. S., Brooks, E. M., Linden, D. R., Sharkey, K. A., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+colonic+motility+and+the+electrophysiological+properties+of+myenteric+neurons+persist+following+recovery+from+trinitrobenzene+sulfonic+acid+colitis+in+the+guinea+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Neurogastroenterol+Motil%22%5BJournal%5D)">Changes in colonic motility and the electrophysiological properties of myenteric neurons persist following recovery from trinitrobenzene sulfonic acid colitis in the guinea pig.</a> Neurogastroenterol Motil. 19, 990-1000 (2007).</li>
<li>Langley, J. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLangley%2C+JN+%22The+Autonomic+Nervous+System%22">The Autonomic Nervous System</a>. , Heffer. Cambridge, UK. (1921).</li>
<li>Linden, D. R., Sharkey, K. A., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+excitability+of+myenteric+AH+neurones+in+the+inflamed+guinea-pig+distal+colon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Enhanced excitability of myenteric AH neurones in the inflamed guinea-pig distal colon.</a> J Physiol. 547, 589-601 (2003).</li>
<li>Linden, D. R., Sharkey, K. A., Ho, W., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclooxygenase-2+contributes+to+dysmotility+and+enhanced+excitability+of+myenteric+AH+neurones+in+the+inflamed+guinea+pig+distal+colon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Cyclooxygenase-2 contributes to dysmotility and enhanced excitability of myenteric AH neurones in the inflamed guinea pig distal colon.</a> J Physiol. 557, 191-205 (2004).</li>
<li>Linden, D. R., Chen, J. X., Gershon, M. D., Sharkey, K. A., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serotonin+availability+is+increased+in+mucosa+of+guinea+pigs+with+TNBS-induced+colitis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Gastrointest+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">Serotonin availability is increased in mucosa of guinea pigs with TNBS-induced colitis.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 285, 207-216 (2003).</li>
<li>Linden, D. R., Couvrette, J. M., Ciolino, A., McQuoid, C., Blaszyk, H., Sharkey, K. A., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indiscriminate+loss+of+myenteric+neurones+in+the+TNBS-inflamed+guinea-pig+distal+colon%5BTitle%5D)+AND+%22Neurogastroenterol+Motil%22%5BJournal%5D)">Indiscriminate loss of myenteric neurones in the TNBS-inflamed guinea-pig distal colon.</a> Neurogastroenterol Motil. 17, 751-760 (2005).</li>
<li>Lomax, A. E., Mawe, G. M., Sharkey, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+facilitation+and+enhanced+neuronal+excitability+in+the+submucosal+plexus+during+experimental+colitis+in+guinea-pig%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Synaptic facilitation and enhanced neuronal excitability in the submucosal plexus during experimental colitis in guinea-pig.</a> J Physiol. 564, 863-875 (2005).</li>
<li>Lomax, A. E., O'Hara, J. R., Hyland, N. P., Mawe, G. M., Sharkey, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+alterations+to+enteric+neural+signaling+in+the+guinea+pig+colon+following+the+resolution+of+colitis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Gastrointest+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">Persistent alterations to enteric neural signaling in the guinea pig colon following the resolution of colitis.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 292, 482-491 (2007).</li>
<li>Strong, D. S., Cornbrooks, C. F., Roberts, J. A., Hoffman, J. M., Sharkey, K. A., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purinergic+neuromuscular+transmission+is+selectively+attenuated+in+ulcerated+regions+of+inflamed+guinea+pig+distal+colon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Purinergic neuromuscular transmission is selectively attenuated in ulcerated regions of inflamed guinea pig distal colon.</a> J Physiol. 588, 847-859 (2010).</li>
<li>Wade, P. R., Chen, J., Jaffe, B., Kassem, I. S., Blakely, R. D., Gershon, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localization+and+function+of+a+5-HT+transporter+in+crypt+epithelia+of+the+gastrointestinal+tract%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Localization and function of a 5-HT transporter in crypt epithelia of the gastrointestinal tract.</a> J Neurosci. 16, 2352-2364 (1996).</li>
<li>Wood, M. J., Hyman, N. H., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Effects+of+Daikenchuto+%28DKT%29+on+Propulsive+Motility+in+the+Colon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">The Effects of Daikenchuto (DKT) on Propulsive Motility in the Colon.</a> J Surg Res. , (2009).</li>
</ol>

Производство этого видео была организована Катамаунт исследований и разработок, Inc, которая производит инструмент, используемый в этой статье.

Нервные-опосредованной пропульсивной моторики желудочно-кишечного тракта впервые была описана более чем сто лет назад Бэйлисс и Старлинг (Бэйлисс и Старлинг, 1899). Это наблюдение привело к назначению нервы кишечника, как кишечные нервной системы (ENS), четкое разделение вегетативной нервной системы (Langley, 1921). Нейрогенная перистальтику кишечника включает в себя растянуть и / или слизистых стимуляции в данной точке и рефлекторных сокращений опосредованной выше, или устные, чтобы, уровень стимула и релаксации в спинным направлении. Результат поколения градиента давления, которые подпитывают просвета содержания в устной к спинным направлении. В тонком кишечнике из различных видов, а у крыс толстой кишки, перистальтические волны сокращений может быть активирован путем инфузии жидкости в просвет кишечника сегментов. В морской свинки дистальной толстой кишки, естественного или искусственного фекальные шарики могут быть вставлены в устной конце толстой кишки и их продвижение по толстой кишке сегменте можно легко контролировать. Таким образом, морская свинка дистальной толстой кишки представляет собой простой и полезный тест для расследования пропульсивной моторики в кишечнике. Перистальтика сложные нейронные рефлекс, который включает в себя ряд соединений нейроактивные и рецепторы. В результате соединения, которые влияют на передачу нервных импульсов в ENS влиять на скорость пропульсивной моторики. Серотонин, выпущенный в основном из клеток энтерохромаффинных в слизистой оболочке кишечника, участвует в инициировании перистальтического рефлекса. Использование морской свинки дистальной толстой кишки, Грайдер и его коллеги показали, что пропульсивной моторики усиливается intralumenal администрации 5-НТ 4 агонисты рецепторов (Фокс-Orenstein и др., 1998;.. Грайдер и др., 1998), в то время как ванна применения 5 -НТ 3 и 5-HT 4 антагонисты рецепторов снижает скорость движения (Кадоваки и др., 1996;. Линден и др., 2003b).. Кроме того, торможение переносчика серотонина с серотонина селективные ингибиторы обратного захвата (SSRI) усиливает перистальтику при низких концентрациях, но снижает перистальтику при более высоких концентрациях, вероятно из-за десенсибилизации 5-HT рецепторов (Кадоваки и др., 1996;.. Уэйд и др., 1996). Другие сигнальные молекулы, которые способствуют морская свинка пропульсивной моторики включают ацетилхолин действует на никотиновые рецепторы, который является основным медиатором межнейронных сигнализации в кишечнике. Блокировка синаптической передачи с никотиновой антагонист рецептора гексаметония уменьшается гранул двигателя при высоких концентрациях, при меньшей концентрации не влияет на скорость движения (Кадоваки и соавт., 1996). Опиаты и агонисты опиоидных рецепторов, которые уже давно известно, что тормозящее действие на желудочно-кишечный моторики, уменьшение гранул движение в морской свинки пропульсивной моторики модели (Фокс-Orenstein и др., 1998;.. Вуд и др., 2009). Интересно, что daikenchuto, традиционные японские фитотерапии используется в клинике для лечения рвоты, болей в животе, и неупорядоченных подвижность, уменьшается скорость движения гранул при приеме внутрь с опиоидных антагонистов налоксона, а при приеме внутрь один, результаты в обратном перистальтику (Wood и соавт., 2009). Эти выводы свидетельствуют о полезности морской свинки пропульсивной моторики модель для оценки вкладов различных соединений и их рецепторов на толстой моделей подвижности. Ряд исследований показал, что воспаление приводит к изменению электрических и синаптических свойства толстой нейронов (Линден и др., 2003a;.. Ломакс и др., 2005), и что эти изменения могут сохраняться в течение недели после выздоровления от воспаления (Краутер . и др., 2007; Ломакс и др., 2007).. Воздействие колит вызванных neuroplastic изменений на пропульсивной моторики могут быть исследованы в морскую свинку дистальной толстой кишки использованием GIMM системы. Эта система имеет ряд преимуществ перед традиционным методом мониторинга моторики толстой, который оценивает пропульсивной моторики просто измеряя время фекальный шарик путешествует по своему расположению. Предыдущие исследования воспаления вызванной нейронной пластичности в толстой кишке указали есть снижение скорости движения гранул (Linden и др., 2003a;.. Линден и др., 2005), однако последние исследования с использованием системы GIMM выявили более сложные изменения (Сильная и соавт., 2010). Например, скорость движения гранул уменьшается в изъязвленные регионов воспаленной дистальной толстой кишки, но подвижность ускоряется в соседних регионах, явление, которое не было признано ранее &quot;Секундомер&quot; методом. Другие исследования показали, что нарушения моторики в период активной фазы воспаления могут быть восстановлены с ингибированием ЦОГ-2 (Linden и соавт., 2004), все же изменили моторику, которая сохраняется заразрешение воспаления ЦОГ-2 без учета регистра (Краутер и соавт., 2007). Кроме того, в этих более поздних исследований, пространственно-временной карты, порожденный системой GIMM выявлено ступенчатое картина толстой моторику, которая наблюдалась в пост-воспалительных животных, способствует снизились темпы движения. В заключение, морская свинка дистальной толстой кишки пропульсивной моторики анализ представляет высокую пропускную способность средства измерения эффектов тестируемых соединений и патологических состояний на толстой подвижность, Кроме того, система обеспечивает GIMM простой и прямой подход к оценке толстой пропульсивной моторики в пробирке. Это позволяет для непрерывного измерения движения гранул, а также генерацию пространственно-временных карт для изучения спонтанной моделей деятельности. По сравнению с традиционными методами, оно также может дать более сложное явление, которое может быть количественно и проанализировать повторно несколько способов, как цифровые файлы сохраняются в системе и легко доступны.

<table><tbody><tr><td>Раствор Кребса&amp;rsquo;</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Изофлуран</td><td>Анестезия</td><td>Webster Veterinary</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Фекальная гранула с эпоксидным покрытием</td><td></td><td></td><td></td><td>высушенная натуральная гранула морской свинки с эпоксидным покрытием (черный лак для ногтей)</td></tr><tr><td>Пинцет</td><td></td><td>Fine Science Tools</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Микрохирургические ножницы</td><td></td><td>Fine Science Tools</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Булавки из нержавеющей стали</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Стаканы</td><td></td><td></td><td></td><td>500 mL</td></tr><tr><td>Газовый баллон</td><td></td><td></td><td></td><td>95% O&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;/5% CO&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;</td></tr><tr><td>Таймер</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Монитор желудочно-кишечной моторики</td><td></td><td>Catamount Research and Development</td><td></td><td>&lt;a href=&quot;http://www.catamountresearch.com/products/gimm.htm">http://www.catamountresearch.com/products/gimm.htm&lt;/a&gt;</td></tr></tbody></table>

Желудочно-монитор подвижность (gimm)

Gastrointestinal Motility Monitor (GIMM)

Желудочно-монитор подвижность (GIMM; Катамаунт исследований и разработок; Сент-Олбанс, VT) является в пробирке системы, которая контролирует пропульсивной моторики в изолированных сегментах морских свинок дистальной толстой кишки. Система состоит из компьютера, видеокамеру, световые ванны орган, перистальтические и нагревают водяной бане циркуляционных насосов, а также нестандартные GIMM программное обеспечение для записи и анализа данных. По сравнению с традиционными методами мониторинга толстой перистальтику, система позволяет GIMM для непрерывного, количественной оценки подвижности. Морская свинка дистальной толстой кишки купается в согреться, насыщенный кислородом раствор Кребса, и фекальные шарики вставлены в устной конца движутся вдоль отрезка толстой кишки в размере около 2 мм / сек. Фильмы фекальные исходя гранул вдоль отрезка в плен, и программное обеспечение GIMM могут быть использованы отслеживать прогресс фекальных пеллет. Курсы пропульсивной моторики могут быть получены для всего сегмента или для какой-либо конкретной области интересов. В дополнение к анализу болюсного вызванных модели подвижность, пространственно-временной карты могут быть построены из захваченных сегментов видео для оценки спонтанных моделей двигательной активности. Применение этой системы включают в себя фармакологическую оценку последствий рецепторов агонистов и антагонистов на пропульсивной моторики, а также оценка изменений, которые следуют из патофизиологических условиях, таких, как воспаление или стресс. Морская свинка дистальной толстой кишки пропульсивной моторики анализа, используя GIMM системы, прост и прост в освоении, а также предоставляет надежный и воспроизводимый метод оценки пропульсивной моторики.

Оценка толстой моторики у морской свинки дистальной толстой кишки с желудочно-монитор подвижность (GIMM) является простым и прост в освоении подход к количественной оценке пропульсивной моторики желудочно-кишечного тракта.

Желудочно-монитор подвижность (GIMM)

Монитор желудочно-кишечной моторики (Gastrointestinal Motility Monitor, GIMM; Catamount Research and Development; Сент-Олбанс, штат Вермонт) представляет собой систему in vitro для мониторинга пропульсивной моторики...

Монитор гастроинтестинальной моторики обеспечивает простой и воспроизводимый метод мониторинга пропульсивной моторики в изолированных сегментах дистального отдела толстой кишки морской свинки. Данная процедура начинается с извлечения толстой кишки из организма животного и погружения ее в подогретый оксигенированный раствор Кребса. Затем в оральный конец вводят фекальные пеллеты, которые перемещаются вдоль сегмента толстой кишки, зафиксированного на видео.Производится запись перемещения фекального пеллета по сегменту, а программное обеспечение отслеживает его продвижение. Помимо анализа скорости пропульсивной моторики, на основе записанных видеосегментов можно построить пространственно-временные карты для оценки паттернов спонтанной двигательной активности. В конечном итоге эта система может быть использована для определения влияния фармакологических соединений на паттерны пропульсивной моторики, а также для оценки изменений, вызванных патофизиологическими состояниями.Основным преимуществом монитора желудочно-кишечной моторики по сравнению с традиционными методами мониторинга моторики толстой кишки является то, что данная система позволяет проводить непрерывную количественную оценку продвижения каловых масс. Кроме того, цифровые видеозаписи каждого испытания в рамках данного эксперимента сохраняются в системе и могут быть повторно проанализированы при необходимости. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области физиологии ЖКТ, например, определить роль различных нейромедиаторных систем в моторике толстой кишки путем оценки влияния агонистов или антагонистов рецепторов на продвижение фекальных пеллет, а также изучить влияние таких состояний, как стресс или воспаление, на паттерны пропульсивной моторики.Для подготовки сегмента дистального отдела ободочной кишки для монитора желудочно-кишечной моторики поместите изолированную ободочную кишку морской свинки в лед с раствором Кребса. Сделайте небольшой надрез на проксимальном конце, чтобы его можно было идентифицировать при последующем помещении кишки в органную ванну. Ткань может находиться в охлажденном растворе Кребса до двух часов перед началом эксперимента.Попытки использовать этот подход на кишечнике крыс и мышей имели ограниченный успех, в то время как при работе с толстой кишкой морской свинки удается получить стабильные результаты. Когда будете готовы приступить к эксперименту, перенесите толстую кишку в органный баньку. Следующий этап, как правило, является самым сложным для исследователя.При первом освоении данной методики необходимо прикладывать правильную силу натяжения при закреплении сегмента ободочной кишки в органо-камере, так как степень натяжения препарата может влиять на моторику посредством активации рефлексов растяжения. По этой причине сегмент ободочной кишки должен закрепляться одинаковым способом одним и тем же исследователем для каждого эксперимента в рамках определенной серии опытов.Отслеживая расположение орального и анального концов, закрепите сегмент дистального отдела толстой кишки длиной не менее пяти сантиметров по обоим концам в органной ванне, оставив небольшой запас слабины, чтобы сегмент мог свободно перемещаться в центре на расстояние до одного сантиметра. После закрепления кишки удалите остатки тканей с внешней стенки, чтобы они не мешали работе программного обеспечения для автоматического отслеживания. Система мониторинга моторики желудочно-кишечного тракта состоит из перфузионной камеры с нижней подсветкой, расположенной над камерой цифровой видеокамеры и компьютера; перистальтические насосы и нагревательная ванна соединяют приточные и отточные каналы с органной ванной, обеспечивая непрерывную перфузию органной ванны предварительно подогретым и оксигенированным раствором Кребса при температуре 37 °C со скоростью потока 10 мл/мин.Оральный конец ободочной кишки, отмеченный ранее сделанным разрезом, должен быть направлен в сторону исследователя. Это облегчит помещение фекального пеллета. Перед началом сбора данных дайте препарату уравновеситься в течение не менее 30 минут.Обычно в течение этого времени происходит выведение естественных фекальных пеллет. Чтобы подготовить монитор желудочно-кишечной моторики к сбору данных, сначала включите источник освещения, затем запустите специализированное программное обеспечение и создайте новый эксперимент в приложении. Начните с сегмента толстой кишки здорового животного без применения каких-либо препаратов, чтобы получить контрольное значение скорости продвижения фекальных пеллет.Поскольку натяжение сегмента толстой кишки может измениться в процессе согревания ткани в органо-термостате, подтяните сегмент так, чтобы поддерживался необходимый уровень слабины. В средней части кишка должна свободно перемещаться в пределах одного сантиметра; при необходимости удалите из препарата излишки ткани. Дважды щелкните по пробному запуску в новом эксперименте и включите камеру, нажав на переключатель.Начните с введения покрытого эпоксидной смолой фекального пеллета в оральный конец сегмента ободочной кишки. Чтобы инициировать перистальтику, нажмите кнопку записи на компьютере для начала регистрации данных. Движение пеллета в анальном направлении фиксируется видеокамерой, а цифровые записи сохраняются на компьютере для последующего анализа.Когда гранула достигнет конца сегмента ободочной кишки, нажмите переключатель записи, чтобы остановить запись. Проведите от трех до пяти испытаний на одном препарате с периодом восстановления в пять минут между каждым запуском. Чтобы определить влияние определенных условий или препаратов на моторику ободочной кишки, проведите от трех до пяти испытаний на каждом препарате для каждого экспериментального условия.Кроме того, проведите каждый эксперимент минимум на пяти различных обдольниках от как минимум пяти разных животных. Скорость продвижения фекальных пеллет рассчитывается как время, за которое пеллет проходит X сантиметров сегмента ободочной кишки. Результаты отображаются на графиках зависимости времени от расстояния, где ось Y представляет расстояние в миллиметрах, пройденное фекальным пеллетом, а ось X — время в секундах; как показано на этом примере с контрольной ободочной кишкой, пеллет продвигался линейно со скоростью около двух миллиметров в секунду.Полученные данные могут быть экспортированы в виде текстовых файлов в Excel для дальнейшего анализа. В отличие от контроля, введение определенных препаратов или воспаление в толстой кишке может привести к нарушению паттернов моторики, таким как остановка или обструкция моторики. Цифровые видеозаписи, полученные в ходе отдельных серий экспериментов, могут быть преобразованы в пространственно-временные карты с помощью специализированного программного обеспечения для оценки паттернов спонтанной двигательной активности или визуальной оценки продвижения фекального пеллета по горизонтальной оси.Изменения диаметра ободочной кишки отображаются в динамике путем преобразования изображения кишки в каждом видеокадре в силуэт, с последующим расчетом диаметра по всей длине и его преобразованием в оттенки серого. В конечном итоге в областях расслабления пеллеты выглядят черными, а в областях сокращения — белыми, что проиллюстрировано на пространственно-временной карте контрольной ободочной кишки. Ось Y представляет положение пеллеты с течением времени.В то время как ось x представляет расстояние, на которое переместился пеллет по сегменту толстой кишки по сравнению с контролем, эти пространственно-временные карты демонстрируют остановку и нарушение моторики, вызванные введением определенных препаратов или воспалением в толстой кишке. Благодаря этой разработке теперь можно оценивать моторику вдоль всего сегмента толстой кишки, а не просто определять скорость на всем протяжении сегмента, а также оценивать спонтанную активность в том же препарате. После освоения простого протокола применение данного метода занимает около двух часов, и в течение одного дня по этой процедуре можно провести исследования на нескольких животных.На той же ткани можно провести другие методы исследования in vitro, например, электрофизиологическую запись.

Research

JoVE Journal

Biology

Биология

Послеоперационная кишечная непроходимость (POI) является осложнением абдоминальной хирургии приводит к увеличению заболеваемости и длительного пребывания в больнице. Потому профилактических или терапевтических стратегий не хватает активизировались исследования необходимы. Поэтому мы установили стандартизированных и возможности мышь модель для изучения патофизиологии POI и изучить потенциальные терапевтические возможности.

Функциональная оценка моторики кишечника и воспаление стенки кишечника у грызунов: Анализы в стандартной модели Кишечные Манипуляции

Измерение in vivo сокращений гладкой мускулатуры вдоль желудочно-кишечного тракта лабораторных животных остается мощным, хотя и недостаточно используемым, методом. Гибкие двухэлементные тензодатчики не доступны в продаже и требуют изготовления. Этот протокол описывает конструкцию надежных, недорогих тензодатчиков для острой или хронической имплантации у грызунов.

Изготовление и Имплантация Миниатюрные Dual-элементных тензорезисторы для измерения<em&gt; В Vivo</em&gt; Желудочно Схватки в Грызунов.

Недавно доступные методы видеозаписи и пространственно-временного картирования (STmap) позволяют визуализировать и количественно оценить как распространяющиеся, так и смешивающие паттерны перистальтики кишечника. Цель этого протокола — объяснить создание и анализ STmaps с помощью системы мониторинга перистальтики желудочно-кишечного тракта (GIMM).

Пространственно-временная Отображение подвижности в<em&gt; Экс Vivo</em&gt; Подготовка кишечника

В этой статье описывается метод видеовизуализации и пространственно-временного картирования с высоким разрешением для выявления изменений в нейронной регуляции моторики толстой кишки у взрослых мышей. С помощью этого подхода можно обнаружить тонкие эффекты на функцию желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) в изолированных тканевых препаратах, чтобы улучшить наше понимание заболеваний желудочно-кишечного тракта.

Видео с изображениями и Пространственно-временные Карты для анализа моторику желудочно у мышей

Это инновационное устройство использует магнито-инерционные датчики, чтобы позволить походку и анализ активности в неконтролируемой среде. В настоящее время в процессе квалификации в качестве меры результата в Европейском медицинском агентстве, одна из приложений будет служить в качестве клинической конечной точки в клинических испытаниях в нервно-мышечных заболеваний.

Домашний монитор для анализа gait и деятельности

Чтобы изучить, как тонкая кишка обрабатывает частицы различных размеров, мы модифицировали установленный метод in vivo для определения транзита тонкой кишки.

Изучение механозондирования просветных частиц мышей тонкой кишки

Представлен метод выделения кишечных трубок крыс и оценки влияния лекарственных препаратов на их натяжение, частоту и амплитуду in vitro. Этот метод предлагает ценный подход для исследователей, изучающих кишечные трубки.

Использование системы перфузии тканей in vitro для обнаружения функциональной активности изолированных кишечных трубок в режиме реального времени

Этот протокол описывает количественный анализ дефекации у молодых мутантов Caenorhabditis elegans с RAC1/CED-10, предоставляя простую модель для изучения стадий продромальной болезни Паркинсона. Он преодолевает ограничения других животных моделей и способствует тестированию терапевтических стратегий, направленных на раннюю патологию паркинсона.

Оценка моторики желудочно-кишечного тракта у мутантов Caenorhabditis elegans RAC1/CED-10 как инструмент для изучения ранней болезни Паркинсона

Мы показываем, что за выражение эпидермального фактора роста рецепторов (EGFR) повышает подвижность нервных стволовых клеток (NSCs) с использованием новых агарозном гель на основе микрожидкостных устройств. Эта технология может быть легко адаптированы к другим млекопитающих ячейку, где ячейка источников не хватает, например, человека нервные стволовые клетки, и повернуться время имеет решающее значение.

Оценка подвижности нейронных стволовых клеток Использование агарозном геле основе микрожидкостных устройств

Простой и надежный способ для визуализации и количественной дыхательных путей подвижность ресничек и реснички создан поток с помощью мыши трахеи описано. Этот способ может быть модифицирован, чтобы определить, как широкий спектр факторов, влияющих реснички подвижность, в том числе фармакологические агенты, генетические факторы, воздействия окружающей среды и / или механических факторов, таких как слизь нагрузки.

Ex Метод естественных условиях для высокого разрешения подвижность ресничек у грызунов эпителия дыхательных путей

Изучите метод оценки пропульсивной мотильности дистального отдела толстой кишки морской свинки с помощью монитора желудочно-кишечной мотильности. Этот подход позволяет количественно анализировать эффекты фармакологических препаратов.

Желудочно-монитор подвижность (GIMM)

Больше видео