Светоактивированная обработка бактериальных биопленок с использованием фотосенсибилизирующего прекурсора

Начинайте с микропластинчатых колодц, содержащих биопленки патогенной бактерии, разделённых на четыре экспериментальные группы.

Аккуратно аспирируйте среду и прополосните буфером, чтобы удалить неприлипшие клетки.

Добавьте буфер с прекурсором фотосенсибилизатора в две группы, в то время как оставшиеся две получают буфер отдельно.

Инкубировать все группы в темноте, чтобы прекурсор мог диффундировать через биопленку, проникнуть в бактериальные клетки и метаболизироваться в фотосенсибилизатор, который накапливается в цитоплазме и мембранах.

После инкубации подвергайте одну группу, обработанную прекурсором, и одну группу, содержащую только буфер, световому облучению.

В группе, обработанной прекурсором, свет возбуждает фотосенсибилизатор, который передаёт энергию молекулярному кислороду и генерирует реактивные кислородные формы (ROS).

ROS разрушает мембраны, разрушает белки и фрагментирует ДНК, что приводит к гибели бактериальных клеток.

Остальные три условия не вызывают ROS, так как либо прекурсор, либо свет отсутствуют, и биопленка остаётся незатронутой.

Для получения биопленки в пластине на 96 лунок сначала инокулятируйте один минус 80 градусов Цельсия, разморозив Staphylococcus aureus в США