Острого инфаркта миокарда у крыс

Крысиной модели острого инфаркта миокарда (ОИМ) полезен для изучения последствий МИ на сердечную патофизиологические и физиологические функции.

Общей целью данной процедуры является моделирование острого инфаркта миокарда у крыс для изучения механизмов передачи сигналов сердца, связанных с немедленной реакцией миокарда на ишемию сердца с последующим реперфузионным повреждением. Эти реакции включают размер инфаркта, площадь риска и гибель клеток. Первым шагом является обнажение левого желудочка путем выполнения небольшого разреза в четвертом межреберье левой стороны грудной клетки и разведения изолированных ребер.

Левая передняя нисходящая артерия или ПМЖ временно перевязывается в течение 30 минут после ишемического периода. Лигирование ПМЖ высвобождается, что позволяет провести сердечную реперфузию после четырехчасового периода реперфузии. ПМЖ лигируется еще раз перед иссечением сердца и исследуется на предмет размера области инфарктного миокарда, входящей и не подверженной риску.

В конечном счете, это результат гистологической оценки инфаркта. Миокард может быть использован для изучения терапевтических стратегий лечения сердечной недостаточности. Этот метод может дать представление о сигнальных механизмах, связанных с немедленными реакциями на ишемию, за которыми следуют серьезные травмы, такие как размер инфаркта, зона риска и гибель клеток.

Эта модель может быть использована для оценки новых терапевтических стратегий лечения ишемической болезни сердца. Демонстрировать процедуру будет старший научный сотрудник и X, старший постдокторант из лаборатории доктора Брэдли Макконнелла на кафедре фармакологических и фармацевтических наук Университета Хьюстона, институциональный член Техасского медицинского центра. Прежде чем начать хирургическую процедуру, операционную поверхность необходимо продезинфицировать с 70% этанолом.

Стерилизуйте все хирургические инструменты с помощью стерилизатора с горячими шариками перед каждой отдельной операцией. Необходимые инструменты включают два хирургических ножницы, один щипец, один изогнутый щипц, два иглодержателя и грудной ретрактор. Отрегулируйте температуру гомеотемической системы одеял так, чтобы она поддерживала температуру тела животного на уровне 37 плюс-минус один градус по Цельсию.

Размер инфаркта зависит от продолжительности окклюзии, а также от температуры тела. Имейте под рукой ватную марлю и аппликаторы для остановки кровотечения. В этих исследованиях используются только те животные, которые проходят физический осмотр путем визуального осмотра, измерения частоты сердечных сокращений, частоты дыхания, температуры тела и массы тела.

Запишите вес и определите характеристики здоровых животных, которым предстоит операция за день до операции. Введите дозу масок с бупренорфином. Халаты и перчатки необходимо носить на протяжении всей процедуры, а между отдельными операциями необходимо менять перчатки.

Для начала сделайте крысу обезболивание и подготовьте место операции, тщательно сбрив шерсть в области шеи и груди. Продезинфицируйте выбритые участки раствором бетадина, а затем 70% этанолом. Повторите эту процедуру три раза.

Поместите животное на гомеотемическую систему одеял для надлежащего поддержания температуры тела. Лежа на его правом боку. Скос краев полиэтиленовой трубки облегчает введение в гортань.

Введите эндотрахеальную трубку с помощью хирургического стереомикроскопа. Аккуратно манипулируйте языком по мере необходимости и держите трахею в поле зрения. Подключите эндотрахеальную трубку к аппарату искусственной вентиляции легких, работающему со скоростью 80 вдохов в минуту и дыхательным объемом 1,2 миллилитра на 100 граммов массы тела.

Как только искусственная вентиляция легких будет достигнута, накройте крысу стерильной простыней, оставив открытой только операционную зону. Как только установится устойчивое дыхание, откройте грудную клетку в левом четвертом межреберье. Сведите к минимуму степень разреза в ткани, чтобы снизить риск кровотечения.

Расположите ретрактор грудной клетки в четвертом межреберье и раздвиньте ребра, чтобы обнажить левый желудочек или ЛЖ, необходимо соблюдать осторожность, чтобы не повредить легкое. Далее откройте перикард, оставив его на месте. По возможности определите проксимальную левую переднюю нисходящую артерию или артерию ПМЖ с помощью хирургического стереомикроскопа.

Временно, перевязать или завязать скользящим узлом ПМЖ, чтобы вызвать ишемию. Заботьтесь о том, чтобы не подвергать само сердце внешнему виду. Лигирование ПМЖ подтверждается наблюдением побледнения ткани миокарда дистальнее шва, а также дисфункции передней стенки в ишемическом периоде.

После 30-минутного ишемического периода начните сердечную реперфузию путем разрезания или отпускания лигатуры вокруг ПМЖ с помощью микрохирургических ножниц. Реперфузия подтверждается возвращением красного цвета в ткань миокарда и демонстрацией некоторого восстановления движения передней стенки, наблюдаемого сразу после выпуска лигирования ПМЖ. Процедура идентична для фиктивных контрольных крыс, за исключением того, что ПМЖ не подвергается временному лигированию.

Снимите ретрактор грудной клетки и сведите ребра прерывистым рисунком шва. Как только ребра будут закрыты, создайте отрицательное давление в грудной клетке, чтобы обеспечить правильное дыхание, втягивая воздух из грудной полости. Наконец, закройте кожу непрерывным швом После операции поместите крысу в клетку с грелкой и контролируйте температуру тела с помощью ректального термометра, частоту дыхания при визуальном осмотре, частоту сердечных сокращений при учащенном сердцебиении и аномальные признаки боли до тех пор, пока животное не станет передвигаться.

Следует ввести стерильный физиологический раствор. Если наблюдаются признаки обезвоживания, введите бупренорфин сразу после операции. После четырехчасового периода реперфузии поместите повторно обезболенную крысу обратно в операционную зону.

Визуализируйте левый желудочек, как показано ранее, и перевяжите LADA во второй раз, иначе узел можно перевязать. Введите один миллилитр 5%-ного синего и физиологического раствора в правую желудочковую камеру и дайте перфузию в течение двух минут. По истечении этого периода введите один миллилитр насыщенного раствора хлорида калия в камеру правого желудочка, чтобы остановить быстрое сердцебиение, иссеките сердце и введите его в подогретый 2% агрофосфат буферизованный физиологический раствор.

Как только агро застынет при комнатной температуре, разрежьте сердцевину на срезы в один-два миллиметра. Окрашивайте жизнеспособный миокард 2%-ным триеном, тетраолеумом хлоридом или TTC в течение 20 минут и сделайте снимок каждого видимого среза. Вот типичное изображение крысиного сердца.

После четырех часов реперфузии область, выделенная синим цветом, представляет собой неокклюзированную или не подверженную риску перфузию. Красными областями обозначена зона риска инфаркта, а бело-желтыми областями обозначен инфарктный миокард в зоне риска. После просмотра этого видео вы должны иметь хорошее представление о том, как действовать при остром инфаркте миокарда у крыс и на животных моделях, используемых для имитации ишемической болезни сердца человека.

Эта модель может быть использована для изучения немедленных реакций на ишемию с последующим реперфузионным повреждением, которое происходит в течение первых нескольких часов, таких как размер инфаркта, риск площади и гибель клеток. Как вы видите в этом видео, удачи в ваших экспериментах.