Руководство Сдержанность и соединение Общие пути введения у мышей и крыс

Основная цель данного видео — познакомить зрителя с различными методами ручной фиксации и введения препаратов мышам и крысам. Мышей и крыс можно фиксировать с помощью ряда техник с использованием одной или двух рук, а также с помощью пластиковых фиксаторов. Демонстрируются способы введения соединений, такие как внутрибрюшинное, подкожное, внутрисосудистое и внутрикожное введение. В видео представлены методы инъекций, а также зондовое введение в желудок и интраназальное введение.

Обучение уверенному, бережному и безопасному обращению с животными является важной частью исследований in vivo. С животными всегда следует обращаться так, чтобы обеспечить безопасность как самого животного, так и исследователя. Как правило, люди, которые только начинают осваивать эти методы, могут испытывать определенные трудности, так как требуется время, чтобы привыкнуть к работе с грызунами.

Грызуны также могут пугать или приводить в замешательство людей, которые только начинают с ними работать. Наглядная демонстрация методов введения дозы и техник фиксации имеет решающее значение как для успешного введения соединения, так и для предотвращения стресса или травм у животного и специалиста, проводящего фиксацию. Мышей можно фиксировать вручную, используя технику с одной или двумя руками.

Первым шагом в обоих методах является осторожное поднятие мыши за основание хвоста на металлическую решетку крышки клетки или аналогичную шероховатую поверхность. При использовании техники одной рукой зажмите основание хвоста между третьим и четвертым пальцами, осторожно потянув хвост назад. Это заставит мышь ухватиться за поверхность и потянуться вперед.

Затем крепко зафиксируйте мышь, захватив ее за загривок той же рукой, которой держите хвост. Захватите область у основания головы указательным и большим пальцами, затем расширьте захват вниз по спине, используя средний и безымянный пальцы.

Оказывайте на кожу вокруг шеи ровно такое давление, которое предотвратит поворот или извивание мыши, но не настолько сильное, чтобы животное не могло дышать. Техника захвата двумя руками схожа, за исключением того, что пока одна рука осторожно оттягивает хвост назад, другая быстро и крепко захватывает мышь за загривок, удерживая хвост в одной руке, а загривок — в другой. Приподнимите мышь и зажмите основание хвоста между ладонью и третьим или четвертым пальцем руки, удерживающей загривок.

Как и прежде, убедитесь, что захват надежен, но при этом животное может свободно дышать. Фиксация крысы за загривок обычно выполняется двумя руками. Сначала извлеките крысу из клетки и поместите ее на шероховатую поверхность.

Затем возьмите крысу за хвост недоминирующей рукой и потяните. Осторожно потянув назад, крепко удерживайте хвост одной рукой, а другой подходите к загривку крысы сзади. Слегка надавите на спину крысы, перемещая руку вверх к лопаткам.

И, наконец, захват за загривок пальцами и ладонью. Крысы могут издавать звуки при фиксации таким способом. При использовании захвата через плечо возьмите крысу за хвост доминирующей рукой и осторожно потяните назад.

Затем поместите недоминирующую руку на спину крысы, подходя сзади. Обхватите крысу в области грудной клетки безымянным пальцем, мизинцем и большим пальцем. Голова крысы должна находиться между указательным и средним пальцами.

Другим методом фиксации является захват под плечевым поясом. Возьмите крысу за хвост доминантной рукой, как показано ранее, и поместите недоминантную руку на спину животного, приближаясь сзади. Затем обхватите крысу за грудную клетку непосредственно под лопатками.

Передние конечности крысы следует осторожно приподнять большим и указательным пальцами. Конечности должны быть скрещены под подбородком крысы, чтобы предотвратить укусы. При фиксации тела животного к самому исследователю крысу можно удерживать таким образом одной рукой.

Для фиксации также можно использовать гибкий конусообразный предмет из тонкого пластика, называемый конусом для декапитации. Протолкните животное вперед, пока его нос не выйдет из отверстия в конце конуса; при этом либо плотно зажмите край конуса вокруг хвоста, либо используйте резинку или пластиковую стяжку, чтобы зафиксировать животное на месте. После фиксации инъекции можно вводить прямо через пластиковый материал; при необходимости доступа к хвосту удобно использовать жесткий пластиковый контейнер.

Поместите крысу в устройство согласно инструкции производителя. При использовании данного типа фиксатора крысу осторожно затягивают в него назад за хвост. Закройте переднюю часть устройства и отрегулируйте зажим, чтобы ограничить движения животного.

Если животные кажутся возбужденными, можно использовать фиксацию полотенцем: когда полотенце набрасывают на животное, создаваемая им темнота и мягкая фиксация помогают успокоить беспокойную крысу. Осторожно накройте крысу полотенцем, затем аккуратно обхватите ее за туловище. Оберните крысу полотенцем, стараясь не закрывать нос животного.

Отодвиньте полотенце так, чтобы область тела для инъекции была открыта. Перед применением любой из следующих техник введения препарата рекомендуется потренироваться в обращении со шприцем. В идеале одна рука должна манипулировать шприцем, в то время как другая фиксирует животное; иглы следует вводить в тело животного срезом вверх, особенно при внутривенных инъекциях.

Иглы малого диаметра легко повреждаются при введении в пробки флаконов. Для забора материалов используйте иглу большего диаметра, а затем замените ее на иглу меньшего диаметра для инъекции. Интраназальное введение применяется для некоторых типов инфекционных агентов в исследованиях аллергии и астмы, а также в некоторых работах по изучению легких.

Интраназальное введение не требует применения анестезии и проведения хирургического вмешательства, в отличие от интратрахеального введения. Для выполнения интраназального введения зафиксируйте животное, как описано ранее; с помощью шприца или дозатора поместите небольшое количество вдыхаемого вещества в ноздри животного. Дождитесь, пока вещество впитается в ноздри, и при необходимости повторите процедуру.

Препараты вводят внутримышечно, если требуется их быстрое всасывание и они могут быть введены в очень малых объемах. Для внутримышечных инъекций может потребоваться два человека, так как одна задняя конечность должна быть свободна и зафиксирована для проведения инъекции. Введите иглу перпендикулярно коже в область четырехглавой мышцы бедра или латеральную поверхность мышц бедра животного.

Будьте осторожны, чтобы не ввести препарат в заднюю мышечную массу, так как существует риск повреждения седалищного нерва. Интраперитонеальное введение выбирают в случаях, когда необходимо ввести большой объем соединения и когда такая скорость абсорбции приемлема для приближения к показателям перорального введения.

Для выполнения внутрибрюшинной инъекции зафиксируйте животное, направив кончик его носа вниз к полу. Чтобы обнажить брюшную полость, определите срединную линию тела животного и мысленно разделите живот на квадранты.

Выберите место инъекции в нижних квадрантах, предпочтительно в нижнем правом квадранте животного; используйте шприц и иглу соответствующего размера, чтобы ввести препарат животному. Подкожное введение вещества используется в случаях, когда требуется медленная абсорбция.

Мыши и крысы имеют большое количество свободной кожи, поэтому подкожно им можно вводить относительно большие объемы препаратов по сравнению с людьми. Для проведения подкожных инъекций зафиксируйте животное в свободном состоянии, как показано ранее. Захватите кожу и осторожно потяните ее вверх.

Создав кожную складку с помощью шприца и иглы подходящего размера, введите иглу под углом от 30 до 45 градусов в приподнятую кожу и введите материал. Признаком успешной инъекции является появление небольшой припухлости под кожей. Если после подкожного введения планируется регулярное обращение с животными, не используйте захват за загривок.

Вместо этого используйте кожу в области дорсальной части крупа. Если животным предстоит несколько подкожных инъекций, чередуйте места введения. Фиксация животных во время внутрикожного введения может быть затруднительна и потребовать применения химической седации. При использовании анестетика убедитесь, что он не препятствует достижению целей исследования.

При выполнении внутрикожной инъекции сначала удалите волосы с места инъекции, чтобы кожа в данной области была отчетливо видна. Введите иглу подходящего размера в кожу под углом от 15 до 30 градусов. Не вводите иглу слишком глубоко.

При правильном введении игла должна встретить сопротивление. Если инъекция прошла успешно, будет видна небольшая припухлость (пузырек), которая светлее окружающего участка кожи. Слегка надавите, чтобы предотвратить обратный ток вещества.

Внутрисосудистое введение применяется для широкого спектра соединений и является оптимальным путем введения, когда соединение может быть соответствующим образом сформулировано и требуется очень быстрый эффект. Для внутрисосудистого введения в латеральную хвоставую вену зафиксируйте животное в конусе для фиксации головы или в пластиковом фиксаторе для грызунов. Как было показано ранее, удерживайте хвост животного за кончик недоминантной рукой, чтобы выпрямить и повернуть его. Поверните хвост на четверть оборота, чтобы хвоставые вены оказались в дорсальном положении.

Выберите одну из двух латеральных хвостовых вен для инъекции, избегая попадания в вентральную хвостовую артерию. Введите иглу в дистальную часть хвоста под углом от 15 до 20 градусов и введите препарат. При успешном введении вещество будет entering в вену без сопротивления, а сама вена будет бледнеть на протяжении всей инъекции.

Размещение места инъекции более дистально позволяет сохранить неповрежденный участок вены, который можно будет использовать в случае неудачи при первой попытке. Интрагастральное введение или оральный зонд применяются только у зафиксированных животных в сознании, так как анестезия или седация повышают риск аспирации; соединения, проходимые через проверку безопасности для перорального применения у людей, часто вводятся таким способом. Начните с выбора иглы для орального кормления подходящего размера.

Длину определяют, удерживая зафиксированное животное в вертикальном положении и производя замер от угла рта. Шариковый наконечник кормовой иглы должен достигать последнего ребра животного; при этом животное фиксируют так, чтобы голова и туловище находились на одной прямой вертикальной линии.

Это выпрямляет пищевод, облегчая прохождение иглы для кормления. Введите шариковый наконечник иглы в рот животного над языком. Когда игла будет на месте, поднимите иглу и шприц, осторожно прижимая их к нёбу, чтобы нос животного был направлен вверх.

При прохождении задней части глотки может потребоваться слегка изменить направление иглы. Любое натяжение иглы указывает на необходимость корректировки положения; продолжайте продвигать иглу до достижения заданной глубины. Игла должна проходить легко, при этом животное не должно задыхаться или заглатывать воздух; введите вещество.

Если наблюдается сопротивление, или если животное задыхается, заглатывает воздух или синеет, немедленно прекратите процедуру и извлеките иглу. После освоения эти методы позволят вам безопасно вводить дозы как крысам, так и мышам, а также эффективно фиксировать их. При выполнении этих процедур важно помнить, что правильная фиксация животного обеспечивает безопасность как для самого животного, так и для оператора.

Не забывайте, что работа с животными в науке — это привилегия и ответственность. Выбор правильного метода фиксации и подходящих путей введения препаратов является залогом как качества научного исследования, так и благополучия животных.