Диагностическое вскрытие и выбранной коллекции тканей и образцов у крыс и мышей

Общая цель данной процедуры заключается в проведении базового вскрытия грызунов. Это достигается путем предварительной записи основной информации о животном. Вторым этапом процедуры является осмотр внутренних органов.

Третьим шагом является сбор образцов, таких как органы или брыжеечные лимфатические узлы. В конечном счете, состояние здоровья животного может быть определено с помощью гистопатологии или других методов. Как правило, люди, которые только начинают проводить вскрытие, испытывают трудности, потому что анатомия грызунов изучается на работе.

Эти методы могут помочь ответить на ключевые вопросы о здоровье животных в исследовательской колонии. Визуальная демонстрация этих методов имеет важное значение, поскольку требуется время, чтобы узнать расположение различных тканей и научиться отличать нормальные ткани от аномальных. Перед усыплением животного соберите информацию о его истории и запишите его текущие характеристики, такие как физическое состояние, поведение, пол, возраст, вес, напряжение и так далее.

Эта запись является жизненно важным возрастом для человека, который будет исследовать ткани перед усыплением животного. Убедитесь, что используются соответствующие средства индивидуальной защиты. Подготовьте вскрытие, щипцы, ножницы, этикетки для контейнеров, фиксирующие, медиа и сборные сосуды.

После усыпления животного оцените его физическое состояние, проверьте наличие аномалий кожи и шерсти, истощения и обезвоживания. Также ищите доказательства искусственных манипуляций, имплантатов или хирургического рубцевания на животном. Далее, используя препарирующий микроскоп, подробно осмотрите все наружные отверстия.

К ним относятся уши, глаза, нос, рот, анус и гениталии. Теперь положите животное на спину на доску для вскрытия, поднимите его кожу с помощью щипцов и с помощью ножниц разрежьте кожу от ануса до подбородка. Далее отразите кожу в стороны и прорежьте брюшную стенку и грудную клетку.

Обнажите грудные внутренности, сделав два боковых надреза вверх по каждой стороне грудной клетки. Обрежьте диафрагму. Затем удалите грудную клетку, разрезав поперек верхней части грудины.

Теперь осмотрите обнаженные органы грудной клетки и брюшной полости. Знайте любые изменения цвета, необычные запахи, размеры, различия, а также отсутствующие или вывихнутые органы. Изучите консистенцию поверхностей органов и обратите внимание на любые тканевые массы или карманы, заполненные жидкостью.

Также обратите внимание на наличие жидкости в любой полости. Продолжайте обследование со стороны желудочно-кишечного тракта. Осмотрите брыжейку на предмет увеличения лимфатических узлов или тканевых новообразований.

Опишите содержимое желудочно-кишечного тракта и тщательно проверьте наличие утолщенных стенок, новообразований или кровотечений. Чтобы осмотреть внутреннюю часть почек, с помощью лезвия сделайте продольный разрез левой почки и поперечный срез правой почки от центра средней линии. Проверьте паренхиму на наличие отклонений.

Теперь осмотрите мочеполовую систему у представителей мужского пола. Определите семенные пузырьки, яички, придаток яичка, мочеточники и перцовые железы у женщин. Определите матку, яичники и мочеточники.

Осмотрите мочеполовую систему на предмет закупорки, карманов с жидкостью, кровотечения или других аномалий. После завершения этих обследований изолируют и иссекают органы-мишени для дальнейшего обследования. Как правило, сердце, печень, почки и селезенка собираются при их удалении.

Погрузите каждый орган в фиксатор или следуйте первым шагам протокола, требующего этих тканей, таким как замораживание или иммуногистохимия, для получения адекватной фиксации. Как правило, ткани погружают в консервант, такой как 10% NBF, в соотношении 20 объемов, фиксирующих ткань на один объем. При работе с крысами собирайте бронхиальный аспират перед носовым аспиратом.

Начните с отражения кожи в подкожных тканях от шейной области, тем самым обнажая слюнные железы и шейную мускулатуру. Затем удалите эти ткани, чтобы обнажить трахею. Сделайте трехмиллиметровый разрез в трахее и введите пипетку, загруженную одним миллилитром жидкости для отбора проб, в просвет трахеи, направленный ежеквартально.

Медленно промывайте жидкость для отбора проб через трахею в легкие три раза. Затем извлеките жидкость для отбора проб и извлеките пипетку из трахеи. Не вся жидкость вернется в пипетку.

Поэтому повторите процесс, если требуется больше жидкости. Для тестирования на мышах. Чтобы взять образец назального аспирата или бронхиального аспирата, получите доступ к АТУ носоглотки с помощью стерилизованных ножниц.

Разрежьте височный нижнечелюстной сустав и отразите нижнюю челюсть в сторону от верхней челюсти, обнажив ату носоглотки для сбора носового аспирата. Вставьте пипетку, наполненную одним миллилитром жидкости для отбора проб, в носовой глоточный ату мыши, или в просвет трахеи крысы. Пипетку следует направить в угол и втолкнуть внутрь.

Так кончик соприкасается с носовым нёбом. Оказавшись там, медленно впрыскивайте жидкость для отбора проб. Когда жидкость попадает в носовую полость, она образует мениски у носового отверстия и также должна быть видна через полупрозрачное ротовое небо.

Однако, если жидкость выходит через рот, переориентируйте пипетку. После полного введения заведите жидкость для отбора проб из носовой полости в пипетку, а затем извлеките пипетку. Начните с захвата трахеи щипцами и прорежьте ее прямо над щипцами.

Затем аккуратно потяните трахею вверх, обрезая тканевые соединения до тех пор, пока не будет иссечен весь набор грудных тканей. Теперь положите легкие плашмя на рабочую поверхность и свободно завяжите кусок шва или веревки вокруг трахеи. Не затягивайте узел, иначе вы не сможете пропустить иглу в трахею.

Теперь наполните шприц фиксатором и введите иглу в отверстие трахеи, одновременно прикрепляя трахею к игле. С помощью щипцов медленно заполните легкие фиксатором, пока они полностью не надуются. Объем фиксатора будет варьироваться в зависимости от возраста животного, напряжения и состояния здоровья.

Если недостаточно надутые ткани будут казаться плоскими, если чрезмерно надутые, пенистая жидкость будет просачиваться из ткани после заполнения, затягивать материал шва или веревку, окружающую трахею, чтобы предотвратить обратный отток фиксирующего средства из легких. Затем поместите надутые легкие в фиксатор. Поместите тушу на чистую доску для вскрытия в брюшном положении лежа и с помощью ножниц и щипцов удалите кожу и мышцы, лежащие над икроножной мышцей.

Затем обезглавьте тушу с помощью маленьких ножниц. Вставьте нижнее лезвие в большое затылочное отверстие и разрежьте среднюю линию тельца движением вверх. Теперь обнажите мозг щипцами, раскрыв икроножную мышцу.

Если патологоанатом предпочитает разрезать участки мозга, находясь в черепе, немедленно поместите череп с открытым мозгом в 10% NBF. В противном случае обхватите голову вокруг носа щипцами или пальцами и аккуратно переверните череп так, чтобы сила тяжести помогла тканям упасть с черепа. Осторожно. Скольжение кривых щипцов вдоль внешнего края мозга, начиная с обонятельных долей.

Продолжайте протягивать щипцы вдоль черепа по направлению к мозжечку, при этом аккуратно зажимая нервы теми же щипцами. Когда мозг высвобождает место в фиксирующее состояние, чтобы сначала определить местонахождение брыжеечных лимфатических узлов, найдите большую часть кишечника в форме комм. Брыжеечные лимфатические узлы представляют собой желтые яйцевидные или сферические комки ткани в брыжейке, прилегающие к слепой кишке.

Они часто немного толще и тверже по текстуре, чем окружающая брыжейка и жир. Препарирующий эндоскоп может быть полезен для дифференциации тканей на первых порах, но с опытом в этом нет необходимости. С помощью щипцов и ножниц изолируйте брыжеечные лимфатические узлы, а затем перенесите их в пробирку для хранения для использования для посева, ПЦР или гистопатологии.

После составления протокола, патологоанатому или ученому предоставляется следующий письменный отчет об объективном и субъективном состоянии при эвтаназии. Дана объективная характеристика тканей до их фиксации, все основные органы брюшной полости и грудной клетки в фиксаторе, головной мозг и брыжеечные лимфатические узлы, а также образцы носовых и бронхиальных аспиратов. После освоения сокращенное вскрытие может занять менее 30 минут.

Выполняя эту процедуру, важно не забывать записывать свои наблюдения за состоянием животного и его тканей. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее представление о том, как проводить полное вскрытие грызунов, включая забор перфузии легких, брыжеечных лимфатических узлов и головного мозга.