Перфузия печени мышей in vivo: метод введения раствора в печень грызуна через воротную вену

После обезболивания и подготовки грызуна найдите воротную вену и просуньте под нее нить. Завяжите свободный узел вокруг воротной вены, не затягивая ее. Это стабилизирует внутривенный катетер позже во время протокола.

Держа иглу внутривенного катетера скошенной вверх и параллельно воротной вене, введите ее в просвет – пространство внутри вены. Втяните иглу и протолкните катетер через вену до венозной разветвленной области печени.

После стабилизации катетера увеличьте скорость перистальтической помпы. Сразу же печень должна побледнеть, так как кровь заменяется перфузионной жидкостью. Перережьте крупный кровеносный сосуд, чтобы откачать еще больше крови и перфузионной жидкости из печени.

Сожмите разорванный сосуд несколько раз, чтобы надуть печень и убедиться, что она полностью лишена крови. Переключите насос так, чтобы он перфузировал буфер в печень. Наконец, кратковременно повторите надувание печени, стараясь не вырвать печень из соединительной ткани.

Чтобы установить катетер воротной вены, сначала с помощью тыльной стороны щипцов переместите кишечник на правую сторону брюшной полости мыши, обнажив воротную вену, и с помощью изогнутых щипцов проденьте 20-сантиметровый кусок швейной