Эхокардиография мышей: неинвазивный метод оценки морфологии сердца

Сначала нанесите эхокардиографический гель на ультразвуковой датчик и на бритую грудь мыши, находящейся под наркозом, закрепленную на согревающей пластине. Поместите датчик слева от грудины, лицом к правой стороне шеи, чтобы получить обзор через сердце, называемый парастернальным видом по длинной оси.

Поверните датчик на 90 градусов по часовой стрелке для парастернального обзора по короткой оси. Используя этот вид, записывайте изображения в М-режиме, чтобы зафиксировать движение сердца с течением времени во время его биения. Чтобы измерить размеры левого желудочка, определите четыре знаковых тканевых границ раздела жидкость на записанных изображениях.

Это граница между полостью правого желудочка и передней стенкой левого желудочка, между этой стенкой и полостью левого желудочка, между этой полостью и задней стенкой левого желудочка, а также между этой стенкой и перикардом.

Затем вычислите расстояния между этими четырьмя интерфейсами. Повторяйте те же измерения, когда сердце находится в диастоле или расслаблено, а также когда оно находится в систоле или сокращается.

Для начала, слегка держа мышь за хвост, используйте стандартные лабораторные весы, чтобы определить массу тела животного. После обезболивания мыши в соответствии с текстовым протоколом слегка сожмите заднюю ногу и посмотрите, не втягивается ли нога. Используйте коммерческую бритву для грызунов, чтобы побрить левую сторону грудной клетки и левую подмышку.

Положите животное на теплую подушку, установленную под углом от 40 до 42 градусов Цельсия, в неглубоком левом положении, головой в положении «12 часов», а хвостом в положении «6 часов». Затем с помощью ленты зафиксируйте левую руку, левую ногу и хвост. Нанесите предварительно подогретый гель для эхокардиографии на выбритую грудь и головку датчика.

Далее расположите датчик эхокардиографа парастернально слева, направив его на правую сторону шеи для получения двумерного парастернального обзора по длинной оси на уровне папиллярной мышцы. Затем поверните преобразователь на 90 градусов по часовой стрелке, чтобы получить обзор по короткой оси. Установите минимальную настройку глубины и зума, чтобы максимизировать качество изображения и частоту кадров. Установите максимальную скорость развертки. Записывайте изображения в 2D-режиме M-режима с короткой осью. Запишите не менее 3 серий по 3 кинопетли сердцебиения для каждого животного.

После получения удачных записей снимите ленту с конечностей и хвоста. Сотрите гель для эхокардиографии с грудной клетки мыши, грелки и датчика. Оставьте мышь под наблюдением на грелке, накрытой салфеткой, чтобы избежать ненужного воздействия света и потери тепла до тех пор, пока она не проснется. Затем посадите животное обратно в клетку.

Анализируйте записанные изображения в М-режиме с точки зрения короткой оси для определения размеров и функции левого желудочка или ЛЖ. Используя идентификацию границы «ткань-кровь» на сохраненных изображениях, измерить толщину передней стенки ЛЖ в систоле и диастоле, внутренний конечно-систолический и конечный диастолический диаметры ЛЖ, а также толщину задней стенки ЛЖ в систоле и диастоле. Измерьте диастолические размеры в момент кажущегося максимального диастолического ЛЖ и конечные систолические размеры ЛЖ в конце самого переднего систолического экскурсии задней стенки ЛЖ. Нажмите на сенсорный экран на значок "Анализ", а затем на значок "LVAWd". Расположите электронный суппорт на границе между полостью правого желудочка и передней стенкой ЛЖ в диастоле.

Затем расположите электронный штангенциркуль на границе между передней стенкой ЛЖ и полостью ЛЖ, чтобы получить толщину диастолической передней стенки ЛЖ. Расположите штангенциркуль на границе между полостью ЛЖ и задней стенкой ЛЖ, чтобы получить внутренний и диастолический диаметр ЛЖ. Расположите штангенциркуль на границе между задней стенкой ЛЖ и перикардом, чтобы получить толщину диастолической задней стенки ЛЖ.

Для определения систолических размеров ЛЖ коснитесь сенсорного экрана значка «LVAWs» и расположите электронный суппорт на границе между полостью правого желудочка и передней стенкой ЛЖ в систоле. Расположите электронный суппорт на границе между передней стенкой ЛЖ и полостью ЛЖ, чтобы получить толщину систолической передней стенки ЛЖ. Расположите штангенциркуль на границе между полостью ЛЖ и задней стенкой ЛЖ, чтобы получить внутренний и систолический диаметр ЛЖ. Расположите штангенциркуль на границе между задней стенкой ЛЖ и перикардом, чтобы получить толщину систолической задней стенки ЛЖ.