Выделение митохондрий: метод выделения митохондрий из образца ткани рака яичников человека

Митохондрии, цитоплазматические органеллы, известные как электростанции клетки, претерпевают радикальные структурные и функциональные изменения во время прогрессирования рака.

Чтобы изолировать митохондрии, возьмите чистую раковую ткань в стеклянную посуду и измельчите ее на мелкие кусочки. Переложите кусочки в пробирку, содержащую буфер для изоляции митохондрий. Гомогенизируйте образец, чтобы разрушить клетки и высвободить их содержимое, включая органеллы.

Центрифугируйте смесь на низкой скорости. Это гранулирует более плотные компоненты, такие как ядра, тканевые остатки и любые интактные клетки, оставляя менее плотные компоненты, такие как митохондрии, микросомы, пероксисомы и лизосомы в надосадочной жидкости. Соберите надосадочную жидкость и центрифугуйте на высокой скорости. Микросомы, будучи относительно более легкими, остаются в надосадочной жидкости, в то время как сырая митохондриальная фракция гранулируется на дне.

Удалите надосадочную жидкость и повторно суспендируйте гранулу в подходящей среде с градиентом плотности. Установите прерывистый градиент плотности, распределив сырую митохондриальную фракцию по слоям в средах разной плотности, расположив их в порядке убывания п