JoVE Encyclopedia of Experiments
Исследования рака
0 просмотров • 3:23 мин • April 30th, 2023
Для начала подготовьте самку кролика, находящуюся под наркозом, в спинном положении. Сделайте хирургический разрез через брюшную стенку, чтобы обнажить брюшную полость. Найдите рога матки. Эти трубчатые структуры аналогичны двум отдельным маткам, отходящим от фаллопиевых труб и раскрывающимся в две отдельные шейки матки с обеих сторон. Хирургическим путем перевяжите рога матки с обеих сторон в месте, расположенном ближе к цервице, чтобы изолировать дистальные области маточных рогов.
Теперь введите желаемую суспензию опухолевых клеток с высоким уровнем метастазирования в миометрий или внешний мышечный слой матки в точку между местом наложения швов и шейкой матки. Поместите рога матки обратно в брюшную полость. Закройте разрез и дайте кролику восстановиться. В течение нескольких дней после инъекции на месте инъекции развивается опухоль. Клетки этой опухоли с высоким метастатическим потенциалом могут перемещаться по лимфатической системе и экстравазироваться в лимфатические узлы, что приводит к метастазированию в лимфатические узлы.
С помощью лезвия скальпеля No 11 сделайте разрез диаметром 2,5 сантиметра, на 1 сантиметр краниально к лобковому симфизу через кожу и подкожную клетчатку. Разрежьте прямую фасцию и рассеките прямые мышцы латерально, чтобы обнажить нижележащую брюшину. Убедитесь, что нижняя поверхность свободна от кишечника или других органов брюшной полости. Резко войдите в брюшину, чтобы определить мочевой пузырь, и проведите пальцем в перчатке вверх, сзади и латерально по верхушке мочевого пузыря, чтобы найти маточные рога.
Извлеките рога матки через разрез брюшной полости так, чтобы они опирались на брюшную стенку. Используйте плетеный рассасывающийся шов 3-0 для проведения одной перевязки швов каждого маточного рога, примерно на 1,5-2 сантиметра дистальнее шейки матки и медиально по отношению к маточным артериям. Затем плотно завяжите швы, чтобы окклюзировать дистальные части маточных рогов.
Для инокуляции миометрия предварительно приготовленной суспензией клеток VX2 необходимо загрузить 1-миллилитровый шприц, оснащенный иглой 27 калибра, 1 миллилитром клеток. Медленно вводите 0,5 миллилитра клеточной суспензии в течение 1 минуты в каждый рог матки проксимальнее места наложения шва между швом и шейкой матки. Затем надавите на место инъекции миометрия в течение 30 секунд, чтобы свести к минимуму утечку клеток. Осмотрите места инъекций и наложения швов на предмет гемостаза перед тем, как поместить рога матки обратно в брюшную полость.