Моделирование метастазирования рака яичников в слизистой оболочке брюшинной полости: метод создания in vitro 3D-модели слизистой оболочки брюшины

Брюшина, или мембрана, выстилающая брюшную полость, представляет собой перитонеальные мезотелиальные клетки, поддерживаемые слоем фиброваскулярной соединительной ткани. Метастазирующие клетки рака яичников прилипают к этой перитонеальной слизистой оболочке и пролиферируют в раковые образования.

Чтобы смоделировать метастазирование рака яичников, начните с взятия человеческих фибробластов в коническую трубку и смешайте их с коллагеном — белком внеклеточного матрикса. Выложите суспензию на тарелку для культур. Инкубируйте для облегчения затвердевания коллагенового матрикса, чтобы внедрить фибробласты и имитировать соединительную ткань брюшины.

Далее добавьте суспензию мезотелиальных клеток поверх фибробласт-коллагенового слоя. Инкубируйте пластину, чтобы мезотелиальные клетки прилипли и образовали монослой на поверхности фибробласт-коллагенового слоя. Эта 3D-органотипическая культура теперь имитирует композицию и архитектуру выстилки брюшины in vivo.

Наконец, засейте эту органотипическую культуру клетками рака яичников и инкубируйте в течение желаемого времени. Раковые клетки яичников высвобождают определенные сигнальные молекулы, которые изменяют мезотелиальный слой, усиливая адгези