Выделение мезотелиальных клеток: метод выделения первичных мезотелиальных клеток из образца ткани сальника человека

Первичные мезотелиальные клетки человека, или ГПМЦ, выстилают многие висцеральные органы, такие как сальник или слой жировой ткани, присутствующий в брюшной полости.

Чтобы изолировать мезотелиальные клетки, начните с погружения образца сальника человека в подходящий буфер для удаления избытка эритроцитов или эритроцитов. Далее поместите сальник в стеклянную посуду и измельчите его на кусочки. Это диссоциирует ткань, высвобождая ГПМЦ вместе с загрязняющими эритроцитами.

Переложите детали в коническую трубку и дайте им оставаться неподвижными в течение желаемого времени. Богатый жиром низкой плотности фарш поднимается наверх, в то время как плотные клеточные компоненты оседают внизу. Далее отсасывайте жидкость на дне, содержащую ГПМЦ и эритроциты, в свежую пробирку.

Центрифуга для сбора ячеек. Удалите буферсодержащую надосадочную жидкость. Повторно суспендируйте гранулу в мезотелиальной питательной среде и инкубируйте в течение желаемого времени. Среда способствует избирательному росту ГПМЦ над эритроцитами.

Наблюдайте за клетками с помощью светового микроскопа, чтобы подтвердить рост мезотелиальных клеток человека кубовидной формы.

После получения хирургического образца сальника чел