Получение первичных клеток рака яичников из твердых образцов: метод культивирования эпителиальных клеток рака яичников из образцов опухолей яичников

Эпителиальные клетки, присутствующие на внешней поверхности яичника, могут подвергаться злокачественной трансформации в раковые клетки, которые могут перерастать в опухоли яичников.

Чтобы выделить эти эпителиальные клетки рака яичников или ЭОК, начните с взятия образца опухоли яичника и измельчите его на мелкие кусочки. Переложите измельченные кусочки в пробирку, содержащую буфер для пищеварения, дополненный нужным ферментом протеаза.

Эти протеазы разрушают белки внеклеточного матрикса в ткани, высвобождая клетки EOC, эритроциты и несколько диссоциированных фибробластов в суспензию.

Процедите клеточную суспензию через ситечко, чтобы отделить взвешенные отдельные клетки от недиссоциированных кусочков ткани. Центрифугируйте суспензию для гранулирования клеток EOC, эритроцитов и фибробластов. Откажитесь от надосадочной жидкости, содержащей фермент.

Ресуспендируйте клеточную гранулу в эпителиальную среду для роста и перенесите ее в чашку для культивирования. Инкубируйте культуру, чтобы позволить клеткам и фибробластам EOC прикрепиться к основанию чашки, в то время как эритроциты плавают в среде.

Удалите взвешенные эритроциты, освежив среду. Со временем среда способствует избирательному