Моделирование рака на основе хориоаллантоисной мембраны у курицы: модель in ovo для изучения опухолегенеза и метастазирования раковых клеток

Хориоаллантоисная мембрана курицы, или CAM, представляет собой сильно васкуляризированную мембрану, обнаруженную в яйцах некоторых позвоночных, таких как курицы. Эта внеэмбриональная мембрана выстилает несосудистую оболочку и функционирует как место обмена газообразным кислородом и углекислым газом между эмбрионом и окружающей средой.

Чтобы создать модель рака CAM, начните с жизнеспособного, оплодотворенного куриного яйца, несущего полностью развитый CAM с частично открытой оболочкой, которая обнажает его ветвящуюся сосудистую сеть. Убедитесь, что CAM отсоединен от мембраны оболочки.

Наденьте стерильное антипригарное кольцо на точку ответвления кровеносного сосуда. С помощью стеклянного стержня аккуратно потрите мембрану внутри кольца, чтобы соскоблить его внешний эпителиальный слой и обнажить нижележащий мезодермальный слой, несущий сосудистую сеть. Пипет охлажденную суспензию раковых клеток смешивают с подходящим внеклеточным матриксом в кольцо. Кольцо ограничивает клеточное рассеивание.

Дайте матрице затвердеть, чтобы обезопасить клетки внутри. Закройте отверстие скорлупы и инкубируйте яйцо в соответствующих условиях. Плотная сосудистая сеть в мезодермальном слое снабжает раковы