Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 3:55 мин. • April 30th, 2023
Трехмерные органоидные культуры раковых клеток повторяют многие патофизиологические особенности рака человека. Таким образом, эти культуры in vitro образуют отличную модель для исследования рака.
Для обработки этих органоидов начните с культуры предварительно сформированных 3D-органоидов, выращенных в подходящей матрице базальной мембраны. Добавьте желаемую среду для восстановления клеток и инкубируйте. Среда способствует деполимеризации матричного геля, высвобождая 3D-органоиды в раствор.
Центрифугируйте эту смесь для гранулирования органоидов. Восстановительная среда, содержащая компоненты матрицы, остается в надосадочной жидкости. Выбросьте надосадочную жидкость. Далее добавьте раствор параформальдегида в гранулу органоида. Химическое вещество проникает в органоидные клетки и связывается с аминокислотами, вызывая сшивание белков и фиксацию образцов. Этот шаг жизненно важен для любых последующих гистологических применений.
Гранулируйте органоиды для отделения и удаления параформальдегидсодержащей надосадочной жидкости. Добавьте к органоидам теплую растопленную агарозу. С помощью иглы отделите и диспергируйте гранулированные органоиды в жидкой агарозе. Дайте агарозе застыть и внед
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео