Функциональная характеристика химиорезистентности: метод оценки лекарственной устойчивости раковых клеток с помощью клоногенного анализа

Чтобы оценить химиорезистентность в раковых клетках, начните с приема многолуночного планшета. Засейте суспензию желаемых чувствительных к лекарствам клеток рака предстательной железы в несколько лунок и суспензию лекарственно-устойчивого варианта клеток в оставшиеся лунки.

Инкубируйте культуру, чтобы облегчить прикрепление клеток к культуральной пластине. Обрабатывайте оба типа клеток диапазоном возрастающих доз выбранного лекарственного раствора. Молекулы препарата проникают в чувствительные клетки и вызывают гибель клеток даже при их самых низких концентрациях. Тем не менее, резистентные клетки выводят молекулы лекарств через специализированные насосы для откачки лекарств, что позволяет им выжить, несмотря на воздействие более высоких концентраций лекарств.

Аспирируйте отработанные среды, содержащие мусор и раствор препарата. Дополняйте свежими немедикаментозными питательными средами. Инкубируйте, чтобы выжившие клетки, устойчивые к лекарствам, могли размножаться и образовывать колонии. Добавьте подходящий раствор для окрашивания, чтобы окрасить колонии живых клеток.

Промойте культуру, чтобы удалить излишки красителя. Посчитайте количество цветных колоний в каждой лунке. Лунки,