Макродиссекция опухолевой ткани FFPE: метод получения специфической опухолевой ткани из неокрашенных образцов

Чтобы начать макродиссекцию, возьмите предметное стекло с тканевым образцом. Кроме того, возьмите предметное стекло с тем же образцом ткани и окрасьте его гематоксилином и эозином для окрашивания H&E.

В нормальных клетках гематоксилин придает нуклеиновым кислотам синий оттенок, в то время как контрокрашивание эозина окрашивает клеточные белки в розовый цвет. Темно-синяя окраска ядра помогает дифференцировать раковые клетки от нормальных.

Наложите окрашенное на H&E предметное стекло на неокрашенное предметное стекло, чтобы выровнять образцы ткани. Найдите часть, содержащую опухолевые клетки, на предметном стекле, окрашенном H&E. Отметьте соответствующую область на незапачканном предметном стекле.

Соскребите нужную ткань с неиспачканного предметного стекла. С помощью влажного наконечника для пипетки соберите соскобленную ткань, чтобы обеспечить легкую передачу образца ткани. Перенесите ткань в трубку, содержащую буфер для лизиса. Компоненты буфера для лизиса переваривают ткань, высвобождая составляющие клетки.

Обработайте лизат подходящей протеазой и инкубируйте при высокой температуре. Протеаза расщепляет загрязняющие ДНКазы, тем самым защищая ДНК от деградации. Храните ДНК, содержа