Криоконсервация на основе витрификации: метод сверхбыстрого охлаждения для сохранения биологических образцов при очень низких температурах для долгосрочного хранения

Витрификация, метод сверхбыстрой криоконсервации, позволяет охлаждать живые клетки и ткани и хранить их при экстремально низких температурах в течение очень долгого времени.

Чтобы витрификовать свежесобранную опухолевую ткань, сначала возьмите ткань на планшет для культуры. Удалите из опухоли все некротизированные участки, жиросодержащие участки или сгустки крови. Промойте салфетку, чтобы удалить следы крови.

Нарежьте ткань на ломтики подходящей толщины. Теперь перенесите срезы в пробирку, содержащую раствор витрификации, состоящий из ДМСО, или диметилсульфоксида, и сахарозы. Эти составляющие действуют как криопротекторы для защиты клеток от замораживания.

Инкубировать при низкой температуре. ДМСО, проникающий в клетки криопротектор, диффундирует через клеточную мембрану и заменяет воду в клетках, предотвращая образование кристаллов льда внутри клетки. В то же время, сахароза, непроникающий криопротектор, действует внеклеточно, способствуя обезвоживанию клеток и уменьшая образование внутриклеточных кристаллов льда, снижая риск гибели клеток.

Поместите уравновешенные срезы опухоли на держатель для салфеток. Далее перенесите эту сборку в жидкий азот для замерзания при температуре мин