Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 3:05 мин. • April 30th, 2023
Во время патологических состояний, таких как рак, активированные нейтрофилы высвобождают нейтрофильные внеклеточные ловушки или НЭО – сеть волокон внеклеточной ДНК, связанных с гистонами и протеолитическими ферментами. Эти структуры захватывают раковые клетки и играют ключевую роль в метастазировании рака.
Чтобы изучить постадгезионное поведение захваченных раковых клеток в НВЛ in vitro, сначала культивировали нейтрофилы низкой плотности - субпопуляцию нейтрофилов - в чашке для культур, покрытой полимером, которая облегчает прикрепление клеток. Инкубируйте для активации нейтрофилов для высвобождения сетчатых НВЛ.
Затем добавьте непроницаемый для мембраны зеленый флуоресцентный ядерный краситель, чтобы окрашивать волокна ДНК в НВЛ. Удалите отработанное средство. Добавьте в культуру нейтрофилов суспензию раковых клеток.
Инкубируйте культуру в течение короткого периода времени, чтобы облегчить взаимодействие раковых клеток с НВЛ. ДНК-компонент НВЛ функционирует как хемотаксический фактор, который стимулирует миграцию раковых клеток и способствует их адгезии к НВЛ.
Удалите отработанное средство. Аккуратно промойте культуру подходящей свежей средой, чтобы удалить все несвязанные раковые
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео