Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 4:37 мин. • April 30th, 2023
Слизистая оболочка кишечника покрыта выступами или ворсинками и инвагинациями или криптами. Крипты — это кишечные железы, которые в первую очередь выделяют пищеварительные ферменты.
Чтобы изолировать крипты тонкого кишечника, начните с размещения мыши, находящейся под наркозом, в положении лежа на спине на доске для вскрытия. С помощью ножниц рассеките брюшину в продольном направлении, чтобы обнажить пищеварительную систему.
Найдите тонкую кишку и осторожно вытяните ее вверх от тела мыши. Отрежьте кишечник у его основания. Переложите собранный кишечник в блюдо, содержащее подходящий буфер. Разрежьте кишечник в продольном направлении, обнажив просвет.
Поместите кишечник просветной стороной вверх на разделочную доску, чтобы обнажить ворсинки. Переместите наклонную стеклянную горку по поверхности кишечника, чтобы соскоблить ворсинки, обнажив целые крипты.
Разрежьте кишечник на крошечные кусочки и переложите кусочки в трубку, содержащую ледяной буфер, чтобы обеспечить минимальное повреждение крипт
.Далее обработайте ЭДТА и инкубируйте. ЭДТА приводит к тому, что целые крипты освобождаются от слизистой оболочки кишечника. Удалите отработанный раствор, содержащий ЭДТА. Добавьте свежий буф
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео